Etapas de operação do kit de teste de imunoglobulina bovina secreta Aelisa:

1. diluição e amostragem de produtos padrão: 10 buracos padrão na placa do pacote enzimático, adicione 100 μl de produtos padrão no primeiro e segundo buracos, em seguida, adicione 50 μl de diluição padrão no primeiro e segundo buracos, misture; Em seguida, a partir de um poço di, segundo poço cada 100 μl adicionar ao terceiro poço e quarto poço, em seguida, no terceiro e quarto poço adicionar 50 μl de diluição padrão, respectivamente, misturar; Em seguida, no terceiro e quarto poço, primeiro, retirar 50 μl, e depois adicionar 50 μl, respectivamente, para o sétimo e oitavo poço, e depois adicionar 50 μl de diluição padrão, respectivamente, no sétimo e oitavo poço, misturar, depois de adicionar 50 μl de diluição padrão do sétimo e oitavo poço para o quinto e sexto poço, e depois adicionar 50 μl de diluição padrão, respectivamente, no quinto e sexto poço, misturar; Após a mistura, cada um dos quintos e sextos poços toma 50 μl e adiciona-o ao nono e décimo poço, e depois adiciona 50 μl de diluição padrão no nono e décimo poço, respectivamente, após a mistura, retira 50 μl do nono e décimo poço. (A quantidade de amostragem de cada orifício após diluição é de 50 μl, com concentrações de 180 ng / L, 120 ng / L, 60 ng / L, 30 ng / e 15 ng / L, respectivamente).

2. amostragem: configurar um buraco em branco (buraco de controle em branco sem amostra e reagente de marcação enzimática, as operações restantes são as mesmas), buraco de amostra a ser testado. Adicione primeiro 40 μl de diluição da amostra no orifício da amostra a ser testada na placa de marcação enzimática e, em seguida, adicione 10 μl da amostra a ser testada (diluição final da amostra é de 5 vezes). Coloque a amostra no fundo do orificio da placa de marcação enzimática, tente não tocar a parede do orificio e agite suavemente.

3. Crescimento a temperatura: usar a placa de membrana de vedação após 37 ° C por 30 minutos.

Distribuição: diluir o líquido de lavagem concentrado 30 vezes (20 vezes de 48T) com água destilada 30 vezes (20 vezes de 48T).

5. lavagem: remover cuidadosamente a membrana de vedação, descartar o líquido, secar, encher cada buraco com líquido de lavagem, deixar em reposo 30 segundos depois de descartar, assim repetir 5 vezes e secar.

Adição de enzimas: Adicione 50 μl de reagente marcador enzimático a cada poço, exceto os poços em branco.

7. Criação térmica: operação e 3.

8. lavagem: operação com 5.

9. exibição de cor: cada buraco adicionar primeiro o agente A50μl, em seguida, adicionar o agente B50μl, agitar suavemente e misturar, 37 ° C para evitar a luz durante 15 minutos.

Terminação: adicionar 50 μl de líquido de terminação por orifício para terminar a reação (neste momento, o azul vira para amarelo).

Medição: medir a absorção fotográfica (OD) de cada orifício em sequência com ar condicionado em vazio zero e comprimento de onda de 450 nm. A medição deve ser feita 15 minutos após a adição do líquido terminante.