Marca de fibrócitos embrionários de ratos 3T3-L1

Informação do produto:

Liquido congelado: 55% base + 40% FBS + 5% DMSO

Temperatura: nitrogênio líquido

Esquema de cultivo A (padrão)：Médio de crescimento: DMEM + 10% NCS + 1% P/S

Condições de cultivo:Fase gás: ar, 95%; CO2， 5%, temperatura: 37°C

Proporção de transmissão recomendada1:3-1:4

Descrição de fundoAs células 3T3-L1 são sublinhas contínuas de 3T3 (ratos suíços) obtidas por clonagem. Quando as células 3T3-L1 passam da divisão rápida para o crescimento e a inibição do contacto, as células 3T3-L1 passam pela pré-gordura para o tipo de gordura. Um alto teor sérico no líquido de cultura pode promover a acumulação de gordura dentro das células 3T3-L1.

Idade (Sexo)embriões

Tipo de célulaCélulas espontâneas

Nível de BiosegurançaBSL-1

Expressão do receptorinsulina, expressa

Instituições de conservaçãoATCC; CL-173 ATCC; CCL-92.1BCRC; 6015

Transporte e armazenamento:

Transporte de gelo seco e recuperação de células sobreviventes

(1) 1mL embalagem do tubo de congelamento para o transporte de gelo seco, após o recebimento do frigorífico de -80 graus de conservação durante a noite para transferir para o nitrogênio líquido ou recuperação direta, se o gelo seco for descoberto volátil e limpo, a tampa da garrafa do tubo de congelamento caiu, quebrou e as células estão contaminadas, entre em contato conosco imediatamente.

(2) Envio a temperatura normal das células sobreviventes de recuperação da garrafa T25 e operação após recepção de acordo com o método de tratamento após recepção das células.

Tratamento após a recepção das células:

1) Depois de receber as células, a parede da garrafa de desinfecção de 75% de álcool coloca a garrafa T25 em uma caixa de cultivo de 37 ° C para colocar cerca de 2-3 h, se a garrafa de cultivo for descoberta danificada, derramamento líquido e poluição celular, por favor, entre em contato conosco após tirar uma foto.

2) Por favor, confirme o estado da célula sob o microscópio 4 ou 5X, ao mesmo tempo tirar 2-3 fotos das células recém-recebidas (10 x, 20 x) e uma foto da aparência da garrafa de cultura, como base para o estado da célula no momento da recepção após a venda.

3) Células adhesivas: as células são colocadas em uma caixa de cultivo de 37 ° C por 2-3h, observando o crescimento das células e a situação de adesão sob o microscópio, algumas células adhesivas podem cair devido à vibração e se agrupar após a queda durante o transporte rápido. Se a densidade de crescimento das células observadas sob o espelho for inferior a 60%, o meio de irrigação pode ser removido da garrafa (se as células não pegadas precisarem de recuperação centrífuga, ressuspender na garrafa original), adicionar o meio de cultura recém-formulado de 6-8 mL e colocar na caixa de cultura celular para continuar a cultura. Se a densidade de crescimento celular for superior a 70% a 80%, a transferência celular pode ser realizada. Durante a transmissão, as células que caíram devido à vibração de transporte precisam ser recuperadas por centrifugação.

Tratamento celular:

1) Recuperação de células congeladas:

O tubo de congelamento contendo 1 ml de suspensão celular é agitado rapidamente para descongelar em banho de água a 37 ° C e adicionado a um tubo centrífugo contendo 4-6 ml de meio de cultura para misturar uniformemente. Centrifuge 3-5min em condições de 1000RPM, descarte o líquido superior e ressuspenda as células no meio de cultura. Em seguida, a suspensão celular é adicionada a uma garrafa de cultura (ou prato) com meio de cultura de 6-8 ml para uma cultura de 37 ° C durante a noite. No dia seguinte, o crescimento celular e a densidade celular foram observados sob o microscópio.

2) Transferência celular: se a densidade celular chegar a 80% -90%, a cultura de transmissão pode ser realizada.

Para a transmissão de células adherentes podem ser consultados os seguintes métodos:

1. Eliminar a cultura e lavar as células 1-2 vezes com PBS sem íons de cálcio e magnésio.

Adicionar 0,25% (w / v) -0,53 mM EDTA na garrafa de cultura (garrafa T25 1-2mL, garrafa T75 2-3mL), colocar-se na caixa de cultura de 37 ° C para digerir por 1-2 minutos (as células difíceis de digerir podem prolongar adequadamente o tempo de digestão), em seguida, observar a digestão celular sob o microscópio, se a maioria das células se arredondar e cair, rapidamente recuperar a mesa de operação, bater alguns toques na garrafa de cultura e adicionar 3-4ml de meio contendo 10% FBS para terminar a digestão.

3. Subir suavemente, centrifugar 3-5min em 1000RPM, descartar o líquido superior, adicionar 1-2mL de líquido de cultura e soprar bem. Divida a suspensão celular em uma proporção de 1: 2 em uma nova garrafa T25, adicione 6-8ml de novo meio de cultura configurado de acordo com as instruções para manter a vitalidade do crescimento das células, e a transmissão subsequente é realizada em uma proporção de 1: 2 a 1: 5 de acordo com as circunstâncias reais.

3) Congelação celular: após a recepção das células, é recomendado congelar um lote de sementes celulares nas primeiras 3 gerações para uso experimental posterior.

Produtos que a empresa está vendendo: