【JD-CW32H】【Equipamento de detecção de peste suína africana seleciona a tecnologia da corrida, todos os tipos de equipamento completo, pronto para uso! Pacote de ensino para ajudar a prevenir a peste suína! 】。

Quão alta é a precisão dos equipamentos de detecção de peste? Será que haverá erro de julgamento?

"O teste mostrou negativo, mas os suínos adoeceram" "Dispositivos diferentes mediram resultados diferentes, qual é exatamente a carta?" A precisão e o erro de julgamento são as preocupações mais preocupantes dos agricultores quando usam equipamentos de teste. A taxa de precisão dos equipamentos de detecção não de peste não é um valor fixo, mas é determinada por vários fatores como o tipo de equipamento, as especificações operacionais e outros, e o erro de julgamento também vem de omissões de detalhes controláveis. Combinando padrões da indústria com casos práticos, desmontamos a verdade um por um.

Classificação do equipamento: qual é a "diferença de escaleira" na taxa de precisão?

Os princípios técnicos dos diferentes equipamentos de teste são diferentes, a taxa de precisão apresenta uma distribuição de escaleira significativa, e cada cenário de adaptação também tem foco:

1. Equipamento de ouro colóide: taxa de precisão de 85% -95%, adaptado à triagem rápida

Os cartões de detecção de ouro colóide (instrumentos) são ferramentas de inspeção rápida na camada de base, cuja precisão é limitada pela sensibilidade e os padrões da indústria permitem erros dentro de ±15%. Os dados experimentais mostram que a taxa de detecção de alta e média concentração de vírus (≥1.000 cópias / μL) em dispositivos de ouro colóide de alta qualidade pode ser superior a 95%, mas a taxa de vazamento de infecção precoce (≤100 cópias / μL) pode aumentar para 10% -15%.

A experiência do mestre Chen, criador de Guangxi, é típica: "O teste de porco quente com cartão de ouro coloide é negativo, não importa, 3 dias depois do início da doença do rebanho de porcos, o teste de PCR de laboratório é confirmado. Este tipo de dispositivo é mais adequado para a triagem inicial de emergência e não pode servir como base de diagnóstico.

Equipamento de PCR: taxa de precisão superior a 98%, diagnóstico preciso

O dispositivo de PCR quantitativa fluorescente em tempo real é o "padrão ouro" da indústria, de acordo com a norma nacional GB / T 18645-2020, sua sensibilidade deve atingir 10 cópias / μL abaixo, especificidade ≥ 99%. Os testes de uma marca de PCR mostraram que a precisão de detecção foi estável em mais de 98,5% para amostras de 10 a 10.000 cópias / μL.

Os dados de aplicação da Hunan Xin Fifeng Co., Ltd. são mais convincentes: "Detectando porcos de rebanho com o instrumento de PCR, 30.000 amostras ao longo do ano, a taxa de erro com revisão de laboratório foi de apenas 0,3%, a necessidade de prevenção e controle precisos. Este tipo de equipamento é a principal ferramenta para o diagnóstico em pequenas e médias fazendas de suínos.

Equipamento conjunto: taxa de precisão superior a 99,5%, adaptado a cenários profissionais

Os dispositivos combinados baseados em novas tecnologias, como RPA-CRISPR/Cas12a, reduzem a interferência de fundo através da tecnologia de separação magnética, com uma precisão superior a 99,5%. Um sistema de triagem totalmente automático equipado por um grupo agrícola com um design integrado de extração - amplificação - detecção de ácidos nucleicos apresenta uma taxa de erro de detecção de apenas 0,1% ao longo do ano, mas esse tipo de equipamento é mais caro e mais adequado para grandes empresas e laboratórios.

Julgamento errado da verdade: 4 principais causas de falsos positivos e falsos negativos

O dispositivo de teste não é “confiável”, o erro de julgamento é dividido principalmente em “falso positivo” (suínos saudáveis ​​são avaliados como positivos) e “falso negativo” (suínos doentes são avaliados como negativos), com os principais fatores centrados em quatro pontos:

Problema da amostra: a coleta e o tratamento são “portas de entrada”

Pesquisadores da Academia de Ciências Agrícolas da China apontaram que a amostragem inadequada é a principal causa de falsos negativos Infecção precoce de suínos é apenas parcialmente desintoxicada, e a taxa de vazamento aumentará drasticamente se apenas sangue ou ganglios linfáticos forem coletados. Em um incidente de contradição de detecção de carne suína em um supermercado em Handan, o consumidor não concordou com os resultados do teste e também pode estar relacionado com lotes de amostras e diferenças de locais.

O transporte inadequado das amostras é igualmente fatal: as amostras de ácidos nucleicos são colocadas a temperatura normal por mais de 4 horas, com taxas de degradação de até 30%, resultando diretamente em falsos negativos. Em uma fazenda de suínos em Henan, três das 15 amostras positivas foram vazadas devido ao transporte de caixas de gelo não utilizadas.

Erro de operação: a “armadilha de detalhes” mais fácil para os novatos

A poluição cruzada é a principal causa de falsos positivos. Se o novo usuário não desinfeta de acordo com as especificações, o resíduo de amostra positiva do pipete contaminará a nova amostra, e os testes de um centro de controle de vacinação mostraram que a taxa de falsos positivos causada pela poluição pode chegar a 5% quando o filtro não é usado para aspirar a cabeça. Além disso, erros de amostragem, como a operação inadequada de uma pistola de pipeta, também podem afetar os resultados, e a precisão pode diminuir em 10% quando o erro excede 2 μL.

3. Reagentes e equipamentos de adaptação: "bons cavalos devem ser equipados com sela"

Kits de baixo custo e de baixa qualidade são o "assassino invisível" da precisão. Alguns kits de pequenas fábricas são insuficientemente específicos, podem reagir cruzadamente com o vírus da peste suína, resultando em falsos positivos; O reagente com sensibilidade insuficiente, a taxa de detecção de baixas concentrações de vírus é inferior a 80%, causando diretamente falsos negativos. Uma fazenda de suínos teve seis casos falsos negativos por causa da ganância com um reagente barato, que acabou perdendo mais de 200.000 yuans.

O dispositivo não calibrado também pode desencadear erros de julgamento: quando o erro de precisão do controle de temperatura do PCR excede ±1 ℃, a eficiência de amplificação diminui em 20%, o que pode levar facilmente a falsos negativos. Calibrar de acordo com as especificações a cada seis meses pode reduzir esses erros a menos de 0,5%.

Características do vírus: "zona cega de detecção" em cepas precoces e fracas

No início da infecção com o vírus da peste suína africana, a carga viral no sangue é extremamente baixa (≤10 cópias / μL) e até mesmo o aparelho de PCR pode fugir. A experiência de Wan Yin Xinxing Farming foi: "Os suínos suspeitos precisam ser testados no dia seguinte, com 3 negativos consecutivos para excluir a infecção". As cepas fracas são mais ocultas, com amostras de tecidos como pulmões, linfonodos e outros 40% mais detectadas do que sangue.

Guia para evitar buracos: 4 passos para melhorar a precisão da detecção

Selecionar a amostra correta e o momento: escolha prioritária de suínos suspeitos + a “dupla amostra” de sangue, infecção precoce + coleta de linfonodos; A amostragem de 24 a 48 horas após o início da doença pode melhorar a taxa de detecção em 30%.

Especificação do processo de operação: desinfetar a mesa e o pipete com 75% de álcool antes da operação, a cabeça de aspiração do núcleo de filtro deve ser usada; Particionamento de amostras positivas e negativas para evitar a contaminação cruzada.

Combinação de reagentes de alta qualidade: escolha o kit aprovado, escolha o produto com sensibilidade ≤ 10 cópias / μL, especificidade ≥ 99%, o melhor reagente pode ser selecionado por meio de testes comparativos.

Controle de qualidade: cada teste deve ser positivo, negativo, controle interno; Os instrumentos de PCR são calibrados a cada seis meses e os equipamentos de ouro colóide são verificados com produtos padrão a cada três meses.

Como demonstra a experiência brasileira com a depuração de não-peste, as operações de especificação podem manter a taxa de erro de julgamento dentro de 1%. Para os agricultores, em vez de se preocupar com a "precisão" do equipamento, é melhor se concentrar em "como reduzir o risco de erro de avaliação" escolhendo o equipamento certo e usando o método certo para tornar os resultados do teste realmente uma "base confiável" para a prevenção da doença.