22RV1 (células de câncer de próstata humana)

22RV1 (células de câncer de próstata humana)

Não. 22RV1; 22Rv-1; 22rV1; CWR22-Rv1; CWR22R-V1; CWR22-R1; CWR22Rv1; O CWR22R

Espécie Humanos

Idade (Sexo) Homens, adultos

Fontes organizacionais Próstata

Características de crescimento Células de parede

Forma celular Tipo de células epiteliais

Descrição de fundo 22RV1 é uma linha epitelial de câncer de próstata humana de transplante heterogêneo (transmitido continuamente em ratos castrados que provocaram declínio do câncer de próstata e recorreram após a injecção do tipo CWR22 de confiança androgênica de seu pai); A linha celular 22RV1 expressa antígenos específicos da próstata. A dihidroxitestosterona estimula ligeiramente o crescimento das células 22RV1 e o produto dissolvido responde imunológicamente aos anticorpos anti-receptores androgênicos por meio de Western Blot; O EGF estimula o crescimento celular 22RV1, mas o TGFβ-1 não inibe o crescimento celular; 22RV1 pode ser tumoral em ratos nus.

Nível de Biosegurança 2

Médio de Crescimento RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P / S

Proporção de transmissão recomendada 1:3-1:4

Frequência de troca recomendada 2-3 vezes / semana

Tempo multiplicado ~ 40 horas

Condições de congelamento

Liquido congelado:55% Base + 40% FBS + 5% DMSO

Temperatura: nitrogênio líquido

Condições de cultivo

Gas: ar,95%； CO2, 5%

Temperatura:37℃

Oncologênico Sim, forma tumores em ratos nus.

Expressão do receptor receptor de andrógeno

Atenção A remoção centrífuga do DMSO é necessária durante a recuperação das células 22RV1. No estágio inicial da recuperação de células congeladas, a quantidade de adesão é pequena e as paredes são dispersas em grupos, mas eventualmente as células se aplanam e se espalham em uma camada única muito boa, o processo leva de 4 a 5 dias. As células crescem lentamente e só podem crescer até 90% da convergência. A taxa de sobrevivência da recuperação das células após a congelação não é alta, a proporção de líquido congelado recomendada é de 90% de soro + 10% de DMSO, usando soro de alta qualidade.

Atenção:

Depois de receber as células, se o gelo seco for descoberto volátil e limpo, a tampa da garrafa de congelamento cair, quebrar e as células estão contaminadas, entre em contato conosco imediatamente.

As células recebidas não abrem a tampa da garrafa, o corpo da garrafa limpa o álcool e coloca-o em uma caixa de cultivo por 2-4 horas (dependendo da densidade celular) para estabilizar o estado celular. Em seguida, observar o crescimento celular sob o microscópio invertido e tirar fotos de múltiplos diferentes das células (recomenda-se tirar uma foto da aparência geral das células ao receber, observar a cor do meio de cultura e se há vazamento, em seguida, tirar o estado das células sob o microscópio, 100 * e 200 * cada), observar se as células estão contaminadas durante o transporte. como base para nossas vendas.

Como o estado da célula é afetado por vários fatores como ambiente, operação e transporte, a empresa só garante que o cliente receba a célula dentro de uma semana após o estado da célula, então o cliente precisa apresentar a prova de recepção da célula após a venda e o cliente fornece o tempo de recepção e a prova de comunicação do pessoal de atendimento ao cliente após a descoberta do problema, o intervalo de tempo não pode ser maior que 7 dias.

Todas as células animais são consideradas potencialmente biológicamente perigosas, devem ser operadas dentro de um banco de biossegurança de nível secundário e, por favor, preste atenção à proteção, todos os resíduos e utensílios que entraram em contato com esta célula devem ser esterilizados antes de serem descartados.

Tratamento celular:

1) Recuperação de células congeladas: descongelar rapidamente o tubo de congelamento que contém 1mL de suspensão celular em banho de água a 37 ° C, adicionando-o a um tubo centrífugo que contém 4-6mL de meio de cultura para misturar uniformemente. Centrifuge 3-5min em condições de 1000RPM, descarte o líquido superior e ressuspenda as células no meio de cultura. Em seguida, a suspensão celular é adicionada a uma garrafa de cultura (ou prato) com meio de cultura de 6-8 ml para uma cultura de 37 ° C durante a noite. No dia seguinte, o crescimento celular e a densidade celular foram observados sob o microscópio.

2) Transmissão celular: se a densidade celular chegar a 70% -90%, a cultura de transmissão pode ser realizada. A célula é uma célula suspensa e ligeiramente adesiva, e a transmissão pode ser feita com referência aos seguintes métodos:

Coleta: coleta as células suspensas na garrafa de cultura para o tubo centrífugo. Lave as células 1-2 vezes com PBS sem íons de cálcio e magnésio. Como a parede celular não é firme após a lubrificação do PBS, as células se desprendem, então o PBS também deve ser reciclado no tubo centrífugo.

Adicionar 0,25% (w / v) 0,53 mM EDTA na garrafa de cultura (garrafa T25 1-2 mL, garrafa T75 2-3 mL) colocado em uma caixa de cultura de 37 ° C para digerir por 1-2 minutos (as células difíceis de digerir podem prolongar adequadamente o tempo de digestão), em seguida, observar a digestão celular sob o microscópio, se a maioria das células se arredondar e cair rapidamente para recuperar a mesa de operação, bater alguns toques na garrafa e adicionar 3-4 ml de meio contendo 10% FBS para terminar a digestão.

3, as células em suspensão coletadas, as células no líquido de limpeza pbs e as células de parede digeridas são centrifugadas em 1000rpml por 5min, descartar a limpeza superior, adicionar 1-2mL de líquido de cultura e re-suspensão e misturar a suspensão celular em proporção de 1: 2 em uma nova garrafa T25, adicionar 6-8ml de acordo com as instruções de configuração do novo meio de cultura para manter a vitalidade do crescimento das células, a transmissão posterior é realizada de acordo com a situação real em proporção de 1: 2 ~ 1: 5.

3) Congelação celular: após a recepção das células, é recomendado congelar um lote de sementes celulares nas primeiras 3 gerações para uso experimental posterior. Exemplos de garrafas T25:

Quando as células são congeladas, de acordo com o processo de transmissão celular, as células digeridas são coletadas no tubo centrífugo, e a contagem da placa de contagem de células sanguíneas pode ser usada para determinar a densidade de congelamento das células. A densidade de congelamento recomendada para células gerais é de 1 x 106 ~ 1 x 107 células vivas / ml.

2, 1000rpm centrífuga 3-5min, remover a clara superior. Suspender as células com o congelador celular preparado, por cada 1 ml de congelador contém 1 x 106 ~ 1 x 107 células vivas / ml distribuído para um tubo de congelamento para distribuir as células para o tubo de congelamento, marcar o nome, álgebra, data e outras informações.

Coloque as células a congelar na caixa de refrigeração do programa durante a noite em um frigorífico de -80 graus, depois transferido para um recipiente de nitrogênio líquido para armazenar. Registre também a localização do tubo de congelamento no recipiente de nitrogênio líquido para consulta e uso posterior.

Passos operacionais:

Passo 1: Tire o congelado sem soro do frigorífico para uso

Etapa 2: Centrífuga para coletar células logarítmicas (células de parede pega para digerir e centrifugar, células suspensas para centrifugar diretamente, velocidade de rotação 1200 rpm ou 250g, tempo 3min)

Passo 3: Eliminar o soro, adicionar a quantidade adequada de líquido congelado sem soro e ressuspender as células

Passo 4: Divida a quantidade de 1 ~ 1.5mL / tubo no tubo de congelamento, aperte a tampa do tubo e marque bem

Passo 5: Mova o tubo de congelamento diretamente para o frigorífico de -80 ° C e transfira-o para o nitrogênio líquido para conservação a longo prazo após 24 horas

Quando não houver caixa de congelamento ou líquido de congelamento não programado, é possível escolher o resfriamento em gradiente manual. No entanto, o resfriamento de gradiente manual não é aplicável a todas as células e o efeito é instável e também requer um teste de congelamento primeiro.

Produtos que a empresa está vendendo:

CCRF-CEM (linfocitos T da leucemia linfocítica aguda humana)

A9 (células do tecido ligativo subcutâneo do rato)

AAV-293 (células renais embrionárias humanas)

Acc-2 (Células de câncer adenocístico da glândula saliva humana)

ACHN (células de câncer renal humano)

AGS (células cancerosas do estômago humano)

Ana-1 (Macrófagos de Rato)

Anglne (células de câncer de ovário humano)

AR42J (células pancreáticas de rato)

ARPE-19 (células epiteliais da retina humana)

AsPC-1 (metastase humana do câncer pancreático)

AtT-20 (células pituitárias de rato)

B16 (células de melanoma de rato)

Bcap-37 (células de câncer de mama humana)

BEL-7402 (Células de câncer de fígado humano)

Fator do trífolo do intestino suínoKit de teste ELISA (ITF)

Linfocía humanaKit de teste suβ(LTB)

Porco brancoKit de teste su3(IL-3)

Proteína metálica de matriz de hamstermei9/Gelatinase B (MMP-9/Gelatinase B) Kit ELISA

Vírus da orelha azul do suínoKit RT-PCR

Vírus do iris de esturjão brancoKit de Reação PCR

Vírus de bolaKit de teste de PCR

Bactéria NeighborlineKit de teste de PCR

Staphylococcus ArletteKit de Reação PCR

Plasma de tecido geralKit de Reação PCR

Plantas geneticamente modificadasKit de teste de PCR genética PAT

22RV1 (células de câncer de próstata humana)Staphylococcus ArletteKit de Reação PCR

1 (Kit de PCR tipo 1 do vírus antiherpes RT-1)

ConosKit de Reação PCR

Vírus da peste suína africanaKit de teste de PCR