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Edifício 24, 1661 Carro Road, Distrito de Xangai, Jiading
Xangai Palaco Biotecnologia Co., Ltd.
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Edifício 24, 1661 Carro Road, Distrito de Xangai, Jiading
Aviso especial: Este produto é usado apenas para pesquisa científica e não deve ser usado para testes clínicos diretos em seres humanos.
Nome do produto:Espectrofotomia visível da caixa de teste de conteúdo de coenzima I NAD(H)
Especificações do produto: 50 tubos / 24 modelos
Método de teste: espectrofotomia visível
Número do produto: BK-01S6322
Categoria de produtos:
Introdução do produto:
| Determinação de significado A coenzima I NAD (H) é amplamente presente em animais, plantas, micróbios e células de cultura, NAD + é o principal receptor de hidrogênio para a glicosilise (EMP) e o ciclo de tricarboxílicos (TCA), o NADH gerado é transmitido através da cadeia eletrônica respiratória (ETC) para entregar os elétrons ao oxigênio, ao mesmo tempo em que sintetiza ATP, forma uma grande quantidade de ROS, enquanto NADH se regenera como NAD +. A maior parte das reações oxidativas na decomposição dos três principais metabólicos, açúcar, gordura e proteína, são realizadas através deste sistema. Os níveis elevados e baixos de NAD(H) e a relação NADH/NAD+ podem ser usados para avaliar a força da glicólise e do ciclo de TCA. Os valores mais elevados de NAD(H) e NADH/NAD+ indicam que as células respiram com maior consumo de oxigênio e estão em estado de peroxidação. Além disso, o aumento da relação NADH/NAD+ também inibe a glicólise e a circulação do TCA. Além disso, os produtos de degradação do NAD+ têm um papel regulador importante na sinalização celular, metabolismo e expressão genética. Princípio de determinação NAD + e NADH em amostras extraídas com extratos ácidos e alcalinos, respectivamente, NADH através da transmissão de hidrogênio do PMS, azul de tiazol oxidado reduzido (MTT) como metachan, valor de absorção fotográfica detectado a 570 nm; O NAD+ pode ser reduzido a NADH pela etanol desidratase, que é detectada com a redução MTT. Instrumentos e suprimentos próprios Espectrofotômetro visível, centrífuga de mesa, pipeta, vaso de vidro de 1 ml, molho, gelo e água destilada. |
Instrumentos e suprimentos necessários:
Espectrofotômetro visível, vaso de vidro de 1 ml (diâmetro de luz de 1 cm), centrífuga de baixa temperatura, pipeta, vaso, gelo e água destilada
Determinação da Superóxido Discriminase (SOD):
Recomenda-se escolher duas amostras para previsão antes do experimento formal, entender a situação do lote de amostras, familiarizar-se com o processo experimental e evitar experimentos.
Amostras e reagentes desperdiçados!
1 Preparação de amostras
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Amostra de tecido: Pegue cerca de 0,1 g de tecido (0,25 g de amostra com água suficiente é desejável), adicione 1 mL de extrato e faça a 4ºC ou banho de gelo homogenizar (ou usar vários tipos de homogenizadores comuns). 4ºC x 12000rpm Centrífuga 10min, remover o limpo como líquido a ser testado. [Nota]: se o volume de amostra for aumentado, pode ser extraído de acordo com a proporção de massa de tecido (g): volume de líquido extraído (mL) de 1: 5 a 10. |
Amostras de bactérias/células: Recolha as bactérias ou células no tubo de centrifugação e descarte depois. Pegue cerca de 5 milhões de bactérias ou células e adicione 1 ml extrair líquido, ultra-som quebrar bactérias ou células (banho de gelo, potência 200W, ultra-som 3s, intervalo 10s, repetir 30 vezes); 12000rpm 4 ° C centrífuga 10min, remover e colocar no gelo para teste. [Nota]: se o volume de amostra for aumentado, o número de bactérias / células (10) 4): O líquido de extração (mL) é extraído em uma proporção de 500 a 1000: 1. amostra de líquido: teste direto; Se for turbulento, torne o teste limpo após a centrifugação. |

Metodologia experimental:
Preparação da Hepatina:
Hepatina em pó congelado 140 unidades / mg, 1 garrafa de gramas, 140.000 unidades por garrafa, pesando 0,1 grama de pó congelado de hepatina, adicionando água salina fisiológica 5ml, combinando 2800 unidades / ml. Tome 50 ~ 100μl parede do tubo úmido, pode anticoagular sangue 3 ~ 5ml, o sangue não coagula. O sangue dos ratos coagula facilmente, por isso é melhor ser mais denso. Pode-se tomar 0,1 g de pó congelado de hepatina, depois de adicionar 3 ml de água salina fisiológica dissolvida, tomar 50 a 100 μl, anti-coagulação de sangue de ratos 2 a 4 ml.
Preparação de hepatina anticoagulante: Tome 0,1 g de pó congelado de hepatina e adicione 2,5 ml de água salina fisiológica. Tome 100 μl a 150 μl em um tubo de plástico ou vidro, a parede do tubo úmido, abaixo de 80 ° C em um forno pequeno (pode ser usado em um forno pequeno para torradeira), gire horizontalmente, a cada 5 a 10 minutos, até que a secagem seja colocada em 4 ° C para conservar, o que pode fazer que 2 a 5 ml de sangue não coagule.
Recolha de amostras de sangue:
O sangue inteiro é dividido em anticoagulante e anticoagulante de acordo com as condições de coleta. Ao mesmo tempo, a camada superior do líquido amarelo não anticoagulante é isolada a que chamamos soro; O líquido amarelo que a camada superior do anticoagulante separa é chamado de plasma sanguíneo.
1, anti-coagulação de coleta de soro: será coletado bom sangue inteiro, deixe em reposo por 1 a 2 horas, a baixa velocidade de separação de soro por centrifugação direta para uso ou conservação.
2, coleta de plasma anticoagulante: coleta de sangue inteiro anticoagulante, depois de inverter levemente o anticoagulante completo, o plasma de baixa velocidade pode ser separado por centrifugação direta (também pode ser deixado em reposo por cerca de meia hora e depois de baixa velocidade de separação de plasma por centrifugação) para uso ou conservação. De acordo com as características de desempenho dos diferentes anticoagulantes, escolha o anticoagulante adequado. Anticoagulantes usados em laboratório são vários sais da hepatina, EDTA e.
Escolha os pontos de atenção anti-coagulação:
A quantidade de anticoagulante adicionada a cada amostra deve ser consistente, ao mesmo tempo que a quantidade de sangue inteiro extraído também deve ser o mais consistente possível;
②, após a coleta de sangue completo anticoagulante deve ser levemente invertido, anticoagulante suficiente, para evitar que parte do sangue não esteja em contato com o anticoagulante e leve à coagulação;
A coleta de plasma anticoagulante é relativamente grande (1 ml de sangue anticoagulante pode separar 0,4 a 0,5 ml de plasma);
4, após a congelação e conservação do plasma recolhido anticoagulante, a turbididade flocular pode aparecer ao descongelar, se houver, a necessidade de remover a turbididade após a centrifugação
para medição.
Caixa de teste de deshidrogenase de formaldeído (FDH) Micrométrica de caixa de teste de deshidrogenase de formaldeído (FDH) Micrométrica
Formaldeidase Deshidrogenase (FDH) caixa de teste Formaldeidase Deshidrogenase (FDH) caixa de teste Espectrofotometria UV Espectrofotometria UV
Caixa de teste de deshidrogenase de acetaldeide (ALDH) Micrométrica de caixa de teste de deshidrogenase de acetaldeide (ALDH) Micrométrica
Espectrofotometria ultravioleta da caixa de teste da acetaldeidase desidratase (ALDH)
Caixa de teste de conteúdo de coenzima II NADP (H) Micrométrico de caixa de teste de conteúdo de coenzima II NADP (H)
Coenzima II NADP (H) caixa de teste de conteúdo Coenzima II NADP (H) caixa de teste de conteúdo espectrofotometria visível espectrofotometria visível
Caixa de teste de NADPase Micrométrica de caixa de teste de NADPase Micrométrica
Espectrofotomia visível da caixa de teste de NADPase Espectrofotomia visível da caixa de teste de NADPase
6 Deshidrogenase de fosfato de glicose (G6PDH) / glucose 6 Deshidrogenase de fosfato caixa de teste 6 Deshidrogenase de fosfato de glicose (G6PDH) / glucose 6 Deshidrogenase de fosfato caixa de teste Micrométrica Micrométrica
6 Deshidrogenase de fosfato de glicose (G6PDH)/Glucose 6 Deshidrogenase de fosfato caixa de teste 6 Deshidrogenase de fosfato de glicose (G6PDH)/Glucose 6 Deshidrogenase de fosfato caixa de teste Espectrofotometria ultravioleta Espectrofotometria ultravioleta
Caixa de teste de deshidrogenase de isocitrato de citoplasma (ICDHc) Micrométrica de caixa de teste de deshidrogenase de isocitrato de citoplasma (ICDHc)
Caixa de teste de deshidrogenase de isocitrato de citoplasma (ICDHc) Espectrofotometria ultravioleta de caixa de teste de deshidrogenase de isocitrato de citoplasma (ICDHc)
Micrométrico de caixa de teste de NADP macetase (NADPME) Micrométrico de caixa de teste de NADP macetase (NADPME)
Espectrofotometria ultravioleta da caixa de teste da NADP macalase (NADPME) Espectrofotometria ultravioleta da caixa de teste da NADP macalase (NADPME)
Caixa de teste de NAD macalase (NADME) Micrométrica de caixa de teste de NAD macalase (NADME) Micrométrica
Espectrofotometria ultravioleta da caixa de teste de NAD-MADME Espectrofotometria ultravioleta da caixa de teste de NAD-MADME
6 Caxa de teste de fosfato-glicato deshidrogenase (6PGDH) 6 Caxa de teste de fosfato-glicato deshidrogenase (6PGDH)
6 Caxa de teste de fosfato-glicato desidratase (6PGDH) 6 Caxa de teste de fosfato-glicato desidratase (6PGDH) Espectrofotometria ultravioleta Espectrofotometria ultravioleta
Caixa de teste de creatina kinase (CK) Micrométrica de caixa de teste de creatina kinase (CK) Micrométrica
Anticorpo fosfo-GEF H1 (Ser886) Factor de Intercâmbio Rhobirdotide fosforilado 2
fosfo-Afadin (Ser1721) Anticorpo à proteína ligada à actina filamentosa fosforilada
ARPC1A Anticorpo do Subtipo 1A da Proteína 2/3 Relacionada à Actina
ANKRD32 Anticorpos de Domínio Repetitivo da Proteína Ancora 32
ATXN7L3B Anticorpo de proteína 3B tipo 7
Anticorpo à proteína infecciosa POP1
Sequência repetida de proteína ancorada ASB5 - Anticorpos da família 5 da proteína caixa de inibidores de sinalização de citoquinas
Hormônio de crescimento vegetal ABP1
Anticorpos fosfo-ATF2 (Thr55) do fator de replicação ativado pela fosforilação 2
ADRA1B alfa-1 anticorpo do receptor B da adrenalina
Anticorpos Bcl-2 alfa
BAT5 anticorpos de proteína transcritora 5 associada ao antígeno de glóbulos brancos B
BTBD1 Proteína do domínio BTB/POZ 1 (NS5A retrotranscriptina 8 do vírus da hepatite C)
Anticorpos à proteína BCL7B
Espectrofotomia visível da caixa de teste de conteúdo de coenzima I NAD(H)Anticorpo BNC2 basonuclin2
BCL7C Anticorpos para Leucemia de Células B/Linfoma Proteina 7
Anticorpos contra a proteína 2 do transtorno metabólico congênito da gordura BSCL2 (paraplesia genética espasmica expressa do cromossomo comum17)
Anticorpo do gene migratório de células B BTG1
BEAN1 Anticorpo à proteína BEAN1
Atenção:
O reagente 2 é uma enzima, não pode ser congelado e colocado no gelo quando usado.
2 – Só precisa de um tubo de controle.
Se o valor de absorção do tubo de controle for maior que 2, recomenda-se diluir o reagente 7 vezes com água destilada (10 μl de reagente + 60 μl de água destilada).
Por que alguns tubos de medição de amostra SOD são maiores do que os tubos de controle, qual a gama de valores de tubos de controle?
O intervalo do tubo de controle é de 0,8-2. O valor de absorção do tubo de controle é muito baixo pode ser (1) o reagente 2 ou o reagente 4 não está atualmente disponível; (2) Não há adição sequencial de reagentes; (3) O tempo de reação não é suficiente, o tempo de reação pode ser prolongado (o tempo de reação de 30 minutos pode ser prolongado para 40 minutos). Valores de absorção de luz elevados no tubo de controle podem ser o múltiplo correspondente do reagente II não diluído de acordo com as instruções de operação.
Se o tubo de medição for maior do que o tubo de controle, pode ser o efeito da impureza na amostra muito grande, para reduzir o efeito da impureza, geralmente a amostra é extraída com água destilada ou líquido de extração diluído 10 vezes depois de medição, geralmente pode tornar a medição normal. Calcule a fórmula multiplicando o múltiplo de diluição correspondente.