Ratos moc1/moc2

Nome da célula： Ratos moc1/moc2Câncer de células escamosas bucais

Linha celular:C57BL/6 Cxcr3-/-

Fonte das células:no exterior

Identificação celular:Certificação STR aprovada

Forma celular:Linfoma poligonal, adesivo + crescimento em suspensão

Base de cultivo:DMEM (contendo NaHCO3 1,5 g / L) (BasMed-AW-013) + FBS 10% + P / S1% 500 ml.

Condições de cultivoar em fase gás, 95%; CO2, 5%. Temperatura: 37 graus Celsius, umidade da bacia de cultivo de 70% -80%

Fundo celular:O câncer de células escamosas bucais (OSCC) é um subconjunto proeminente do câncer da cabeça e do pescoço, e o principal fator de risco para a ocorrência de OSCC é a exposição a carcinógenos, o que distingue este subgrupo de câncer da cabeça e do pescoço do câncer da cabeça e do pescoço induzido por um vírus humano. No entanto, o pronóstico da OSCC permaneceu estável durante décadas, levando a um aumento das taxas de morbidade e mortalidade.

Utilização celular:Apenas para uso científico

Atenção

1. A atividade celular MOC1 é particularmente alta, a velocidade de agregação de valor é muito rápida, não é recomendado que a densidade de transmissão seja muito grande, e escolha um pouco mais rara, e assim por diante, cerca de 80% da transmissão, é difícil de digerir, colocar no recipiente para a digestão, o tempo é de cerca de 3-4 minutos depois de tirar.

2. A adesividade das células MOC2 e a semelhança das células convencionais não são particularmente fortes. O ciclo de multiplicação também não é rápido MOC1. Tratado com métodos digestivos convencionais.

3.No lado do recipiente de cultura para bater para ajudar as células a cair, o processo de bater dura cerca de 2 minutos antes de perder a maioria das células, se a proporção de perda ainda não é muito, também pode ser colocado novamente na caixa de cultura para continuar a digerir 1-2 minutos depois de tirar novamente para tirar de bater, espera que 80-90% das células sejam retiradas depois de terminar a digestão, a centrifugação suspenda novamente a garrafa, dispersa uniformemente.

Envio a temperatura normal

Depois de receberT25 garrafa desinfectar e colocar a caixa de cultivo 2-3 horas depois de observar a densidade e o estado tirar fotos 2-3 comentários para a venda, a densidade pode ser transmitida. A proporção de transmissão pré-geração 1: 2, etc. é recomendado congelar uma garrafa inteira em um tubo de congelamento de 1 ml, e a outra garrafa continua a transmitir, congelando repetidamente 2-3 exemplares apenas depois de ampliar para fazer experimentos, a fim de evitar que as circunstâncias súbitas causem a ruptura.

Envio de gelo seco

Tubo de congelamento de entrega de células convencionais2, recuperação 1, outro de reposição, uma recuperação não foi bem sucedida quando estritamente de acordo com os requisitos do fabricante para recuperar a segunda, nenhuma situação de sucesso de recuperação imediatamente manter a foto de recuperação para nos notificar.

Células de parede

1. Eliminar a limpeza de cultivo, usando a que não contém íons de cálcio e magnésioPBS lavar as células 1-2 vezes.

2. Inscrever0,25% (w / v) garrafa T75 2-3mL), colocado em uma caixa de cultura de 37 ° C para digerir por 1-2 minutos (as células difíceis de digerir podem prolongar adequadamente o tempo de digestão),

Em seguida, observe a digestão celular sob o microscópio e, se a maioria das células se arredondar e se desmontar, recupere rapidamente a mesa de operação e toque algumas vezes na garrafa de cultura e adicione.3-4ml contém 10% de FBS para terminar a digestão.

３. Depois de bater suavemente, emCentrifuge 3-5min sob 1000RPM, descarte o líquido superior, adicionando 1-2mL de líquido de cultura depois de soprar bem. A suspensão celular é dividida em uma proporção de 1: 2 em uma nova garrafa T25 / placa de Petri de 6 cm, e a transmissão subsequente é realizada em uma proporção de 1: 2 a 1: 5 de acordo com as circunstâncias reais.

4. Congelação celularUma vez recebidas as células, é recomendado congelar um lote de sementes celulares durante a cultura das primeiras 3 gerações para uso experimental posterior.

５. Mídios para transporte(O meio de irrigação) não pode mais ser usado para cultivar células, por favor, substitua o meio de cultura recém-formulado de acordo com as condições de cultura celular do manual para cultivar células.

Células suspensas

As células que crescem em suspensão podem manter o estado de crescimento das células adicionando meios à garrafa, geralmente a densidade celular é mantida em1 x 105 ~ 1 x 106 peças / mL (diferentes células têm diferentes requisitos de densidade) pode manter o crescimento normal das células. Se necessário, a garrafa pode coletar a suspensão celular em um tubo de centrifugação de 1000 rpm, centrifugar 5min, descartar a limpeza superior, adicionar 1-2mL de cultura depois de ressuspender e misturar a suspensão celular em uma proporção de 1: 2 para a nova garrafa T25, adicionar 6-8ml de acordo com as instruções do novo meio de cultura configurado para manter a vitalidade do crescimento das células, a transmissão posterior é realizada de acordo com a situação real na proporção de 1: 2 ~ 1: 4.

Segurança Biológica

1. Todas as células animais são consideradas potencialmente biológicamente perigosas e devem ser operadas dentro de um banco de biossegurança de nível secundário, com cuidado, todos os resíduos e utensílios que entraram em contato com a célula devem ser esterilizados antes de serem descartados.

2. É recomendado usar sempre luvas de proteção, roupas e máscaras de proteção durante a recuperação de células congeladas. Observação: O tubo de congelamento submerso em nitrogênio líquido vai vazar e vai lentamente encher o nitrogênio líquido. Quando descongelado, a fase de conversão de nitrogênio líquido em gás pode fazer com que o recipiente exploda ou sopra a tampa com força perigosa, gerando detritos volantes que causam danos pessoais.