Polímero D-lisina (peso molecular: 15-300 mil)

Poli-D-lisina (MW 150.000-300.000)

Polímero D-lisina (peso molecular: 15-300 mil)

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Poli-L-lisina (PLL); Poli-D-lisina (PDL); Gelatina em gelatina; Colágeno Tipo I Colágeno Tipo I; Fibronectina fibrolina; cola matriz Matrigel; CAS：27964-99-4；

Informação do produto:

Introdução básica:

A polilisina é um polímero de aminoácidos com carga positiva, capaz de se ligar ao DNA, membranas de glóbulos vermelhos ou qualquer proteína com carga negativa, e é um fator de adesão celular não específico que promove a adsorção celular à matriz de fase sólida. O mecanismo de ação é que aumenta a interação eletrostática entre íons de carga negativa na superfície da membrana celular e a superfície da matriz de fase sólida (como placas de petri celular, portadores de slides, etc.). Após a adsorção à superfície da cultura, a polilisina aumenta o número de locais de ligação catiônica usados ​​para a ligação celular. O tamanho do peso molecular da polilisina está relacionado com a viscosidade, isto é, menor peso molecular, menor viscosidade, mais fácil de usar; Peso molecular elevado, viscosidade elevada e mais locais de adesão fornecidos. A polilisina com um peso molecular > 30.000 é adequada para promover a adesão celular a uma matriz sólida.

Existem dois subtipos comuns da polilisina, o tipo D e o tipo L. Como a polilisina é um fator de adesão não específico para a ligação celular, ambos os subtipos podem ser usados ​​como matrizes sólidas envolvidas e podem promover o crescimento adjacente das células em culturas celulares. A polimerizada L-lisina foi relatada para melhorar a adesividade das proteínas em placas de cultivo ELISA. No entanto, em aplicações celulares, algumas células são capazes de hidrolizar a poli-L-lisina. Essa situação requer o uso de poli-D-lisina como fator de adesão para proteger as células de serem destruídas pela ingestão excessiva de L-lisina.

Este produto é poli-D-lisina (Poli-D-lisina), com um peso molecular de 150.000-300.000, adequado para a cultura celular. Usado como uma matriz de cultura celular, a quantidade recomendada é: para uma placa de cultura de 25 cm2 é necessária uma solução de polilisina de 0,1 mg / ml de aproximadamente 0,5 ml-1,0 ml. Este produto também pode ser usado como adesivo para análises histológicas.

Conservação e transporte

Conservação: -20°C, estável por 3 anos.

Transporte: transporte de sacos de gelo.

Atenção

Em algumas aplicações de cultura celular, algumas células digerem e absorvem a poli-L-lisina, e a ingestão excessiva de poli-L-lisina produz certa citotoxicidade. Por isso, é recomendado usar poli-D-lisina, como Poly-D-lysine (Mw 150,000-300,000)（#MX0922）。

Este produto é fornecido na forma de ácido hidrobromido (HBr), para remover o ácido hidrobromido deste produto, este produto pode ser dissolvido em tampão neutro, diálise para remover íons salinos.

Para sua segurança e saúde, por favor, use o traje experimental e use luvas descartáveis ​​para operar.

Uso

1. Preparação do líquido de armazenamento

Depois de dissolver completamente o pó de 10 mg em água desionizada estéril de 2 ml, depois de filtrar a esterilização com a membrana filtrante de adsorção de baixa proteína de 0,2 μm, você obtém um líquido de armazenamento de poli-D-lisina de 5 mg / ml, que pode ser usado diretamente para fins de cultura celular. Para manter a poluição causada por vários usos, o líquido de armazenamento pode ser dividido em um tubo estéril em uma única quantidade, conservado a 4 ° C ou -20 ° C, com uma validade de pelo menos 1 ano.

2. Pacote de cultura celular é matriz

Experimentos de embalagem relacionada com células com poli-D-lisina requerem otimização das condições de embalagem de acordo com diferentes linhagens celulares e aplicações. Os passos gerais são os seguintes:
1) Use água de cultivo de tecido estéril ou PBS para diluir 5mg / ml de líquido de armazenamento de poli-D-lisina para a concentração de embalagem adequada ao seu próprio sistema experimental. Normalmente, o prato de petri comumente usado é usado em uma concentração de 0,1 mg / ml, imediatamente após diluir o líquido de armazenamento 50 vezes.

2) As condições estériles são submetidas a placas de cultura celular, a quantidade de uso de 0,5ml-1,0ml / 25cm2. Agite suavemente o fundo da placa para que ela cobra toda a placa.

3) Depois de 5 minutos, remova a solução de superfície da placa de cultivo com uma arma e limpe a placa com água de cultivo de tecido estéril ou PBS; [Nota]: Algumas situações levam 1 a 2 horas para completar a placa de pavimento, às vezes a placa de pavimento precisa passar a noite. Dependendo das circunstâncias.

4) Depois de secar pelo menos 2 h, a cultura celular pode ser realizada.

[Nota]: Se os vasos de vidro ou as lâminas após a embalagem de polilisina tiverem de ser esterilizados, podem ser esterilizados por radiação gamma (em vez de esterilização por alta pressão).

[Nota]: se a superfície do pacote é irregular, pode ser usado acetato de magnésio 1mM pré-tratamento de vidro portador 2-3h, limpar completamente e começar a embalar. Alternativamente, o portador de vidro é limpo com ácido (ácido clorhídrico ou ácido sulfúrico), o tratamento pode tornar o pacote de solução de polilisina muito liso.

3. Estudo histológico (embalagem de slides)

Uma solução de poli-D-lisina de 0,1% (w/v) é geralmente recomendada para a preparação de slides histológicos. Após 5 minutos de tratamento com a solução de polilisina na concentração apropriada, limpe o slide e seque-o à temperatura ambiente durante a noite ou seque-o em um forno a cerca de 60 ° C por ~ 1 hora. [Nota]: Esta solução de trabalho é mantida em garrafas de plástico a 4 ° C e limitada ao uso de menos de 4 vezes.

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Escrito/editado por V. Shallan

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