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Edifício 24, 1661 Carro Road, Distrito de Xangai, Jiading
Xangai Palaco Biotecnologia Co., Ltd.
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Este kit é somente para uso de pesquisa. O laboratório da empresa fornece testes de detecção gratuitos, 7 resultados do nascer do sol de trabalho, fornecendo dados brutos!
| Nome do produto | especificação | Método de teste | Número da mercadoria |
| Micrometria de caixa de teste de conteúdo de coenzima I NAD(H) | 100 tubos / 48 modelos | Método Micrométrico | BK-S01321 |
Introdução do produto:
| Determinação de significado A coenzima I NAD (H) é amplamente presente em animais, plantas, micróbios e células de cultura, NAD + é o principal receptor de hidrogênio para a glicosilise (EMP) e o ciclo de tricarboxílicos (TCA), o NADH gerado é transmitido através da cadeia eletrônica respiratória (ETC) para entregar os elétrons ao oxigênio, ao mesmo tempo em que sintetiza ATP, forma uma grande quantidade de ROS, enquanto NADH se regenera como NAD +. A maior parte das reações oxidativas na decomposição dos três principais metabólicos, açúcar, gordura e proteína, são realizadas através deste sistema. Os níveis elevados e baixos de NAD(H) e a relação NADH/NAD+ podem ser usados para avaliar a força da glicólise e do ciclo de TCA. Os valores mais elevados de NAD(H) e NADH/NAD+ indicam que as células respiram com maior consumo de oxigênio e estão em estado de peroxidação. Além disso, o aumento da relação NADH/NAD+ também inibe a glicólise e a circulação do TCA. Além disso, os produtos de degradação do NAD+ têm um papel regulador importante na sinalização celular, metabolismo e expressão genética. Princípio de determinação NAD + e NADH em amostras extraídas com extratos ácidos e alcalinos, respectivamente, NADH através da transmissão de hidrogênio do PMS, azul de tiazol oxidado reduzido (MTT) como metachan, valor de absorção fotográfica detectado a 570 nm; O NAD+ pode ser reduzido a NADH pela etanol desidratase, que é detectada com a redução MTT. Instrumentos e suprimentos próprios Espectrofotômetro visível/calibrador enzimático, centrífuga de mesa, pipeta, placa de quartzo de 96 buracos, cerâmica, gelo e água destilada. |
Composição e formulação de reagentes:
Liquido de extração: 100 ml x 1 garrafa de líquido, conservar a 4 ° C.
Reagente 1: garrafa de líquido de 5 ml x 1, conservado a 4 ° C à luz.
Reagente 2: garrafa líquida de 15 ml x 1, conservar a 4 ° C.
Reagente 3: garrafa de líquido 3 mL x 1, conservar a 4 ° C.
Reagente 4: garrafa de líquido 3 mL x 1, conservar a 4 ° C.
O resultado do experimento determinou que eu tinha um truque:
Os resultados da medição quantitativa calculam o conteúdo do objeto a ser testado na amostra de acordo com a curva padrão.
2, o valor de OD do buraco da amostra é maior do que o valor de OD de controle negativo + 2 ~ 3SD, como o limiar de resultado positivo.
3, com o valor de P / N (valor de OD de poro positivo / valor de OD de poro negativo) maior ou igual a 2,1 como positivo, valor de P / N menor que 2,1, mas maior que 1,5 como suspeito, P / N menor que 1,5 como negativo.
4, o método de calibração visual do kit de ELISA: após a adição de substância por enzimíse e terminação da reação, a cor do buraco positivo observada ao olho nu é claramente mais profunda do que (a lei da concorrência é mais clara do que) o controle negativo, e a cor do controle negativo é mais próxima, e é considerada negativa.
Compartilhe com você a classificação e os requisitos dos reagentes instáveis mais comuns:
① Fácil volátil, o reagente de baixo ponto de combustão deve ser selado, colocado na sombra, ventilado, longe da fonte de fogo.
② A substância que reage com o vapor de água deve ser selada e mantida longe da fonte de água.
② Fácil com o efeito do oxigênio do reagente, deve manter o seu sólido ou cristal selado, não é aconselhável armazenar a longo prazo a sua solução aquática, ácido sulfúrico, solução de ácido hidrosulfúrico para armazenamento selado, potássio, sódio, fósforo branco mais para tomar a forma de vedação líquida.
A substância que reage com o dióxido de carbono deve ser selada e preservada, e a solução correspondente é mais fácil de reagir do que o sólido, portanto, preste mais atenção à preservação selada.
O reagente volátil ou auto-decomposto deve ser selado e mantido em um lugar fresco e ventilado.
Passos operacionais:
1. Preparação da amostra:
Preparação de amostras celulares: coletar as células e lavar 1-2 vezes com PBS pré-refrigerado a 4 ° C ou banho de gelo ou água salina fisiológica. A precipitação é homogenizada com um lito de células de tecido pré-refrigerado a 4 ° C ou banho de gelo (homogenizador de vidro ou vários tipos de homogenizadores elétricos comuns podem ser usados). Em seguida, homogeneize a solução para centrifugação a 4 ° C e colete a limpeza como amostra a ser testada.
Preparação de amostras de tecido: amostras de tecido são obtidas após a remoção do sangue com água salina fisiológica (0,9% NaCl, contendo 0,16 mg/ml). De acordo com a proporção de 500-1000ul de lisote de células de tecido adicionado por 100mg, homogeneize a 4 ° C ou banho de gelo (homogeneizador de vidro ou vários tipos de homogeneizadores elétricos comuns podem ser usados). Em seguida, homogeneize a pasta a 4 ° C e colete a limpeza como amostra a ser testada.
Determine a concentração de proteína usando o kit de concentração de proteína BCA (P1511). Normalmente, a vitalidade média de SOD em amostras de molho homogêneo de células ou tecidos de 10-20ug de proteína é de cerca de 1 unidade de vitalidade (as diferenças entre células e tecidos diferentes serão relativamente grandes, essa faixa de vitalidade serve apenas como referência preliminar). A quantidade de proteína de 20-100 ug preparada para cada amostra é geralmente suficiente para testes posteriores.
e. Diluir adequadamente a amostra com o tampão de detecção de SOD fornecido no kit, de acordo com a concentração de proteína e o uso previsto de proteína. Por exemplo, o fígado do rato geralmente precisa ser diluído de 10 a 100 vezes. As amostras preparadas podem ser guardadas no banho de gelo se forem medidas no mesmo dia; Se a medição não for concluída no mesmo dia, pode ser congelada a -70 ° C, mas é recomendado tentar concluir a medição no mesmo dia.
2. Preparação do kit:
Preparação do líquido de trabalho enzimático WST-8: de acordo com a quantidade de amostras a serem testadas (incluindo produtos padrão), prepare a quantidade adequada de líquido de trabalho enzimático WST-8, o líquido de trabalho enzimático WST-8 preparado é conservado a 4 ° C ou banho de gelo, pode ser usado no mesmo dia, mas é recomendado que esteja disponível.
Observação: Como a solução enzimática é baixa e facilmente depositada, é necessário ter cuidado em centrifugar suavemente antes de usar e depois misturar adequadamente.
b. Preparação do líquido de trabalho de início da reação: misture o líquido de início da reação (40X) fornecido pelo kit e dilua a proporção de 1 μl de líquido de início da reação (40X) com a adição de 39 μl de tampão de detecção de SOD, ou seja, o líquido de trabalho de início da reação. 4 ° C ou banho de gelo, pode ser usado no mesmo dia, mas é recomendado que esteja disponível.
c. (opcional) Preparação do produto padrão SOD: é necessário ter o produto padrão SOD próprio, diluir o produto padrão SOD com a diluição fornecida nesta caixa para as seguintes concentrações: 20U / ml, 10U / ml, 5U / ml, 2,5U / ml, 1,25U / ml, 0,625U / ml. No teste subsequente, 20 microlitros podem ser tomados cada um e amostras de referência podem ser testadas. Descrição: para evitar a diminuição da atividade enzimática SOD após a diluição, a diluição padrão SOD é recomendada; Este kit de teste para SOD não requer SOD como um produto padrão, mas pode ser usado como um controle positivo ou como referência para a quantificação da atividade de SOD.
Anticorpo AHA3 AHA3
Anticorpo de fosfato de sódio e potássio ATP1A1 (Ser23)
phospho-ASK1 (Ser83) Anticorpo regulador do sinal da apoptose da kinase 1
AADACL1 Anticorpo da Hidrolase 1
Anticorpos astrocíticos humanos
Anticorpos da Aldolase A
Anticorpos de Annexin VI
Anticorpos beta-amiloides (25-35) beta amiloides (25-35)
Anticorpos de angiotensina I
Anticorpos de adrenomedulina (péptido N-terminal 20)
Arfaptin 2 Anticorpo à proteína de ligação ao fator riboquímico ADP 2
Anticorpos do receptor de pressônica 2 AVPR2
Anticorpos ASC associados à apoptose
Anticorpos de ligação à proteína filaminal Afadin
Antitrombina III 抗3抗体
Anticorpo monoclonal de albumina sérica humana (3F4)
Proteína recombinante CUB e Zona Pellucida como domínios 1 (CUZD1)
Família de Domínio de Lectina Tipo C Recombinante 11, Membro A (CLEC11A)
Domínio de Lectina Tipo C Recombinante Família 2, Membro C (CLEC2C)
Dermokina recombinante (DMKN)
Proteína relacionada com Dickkopf 2 (DKK2)
Discos recombinantes, proteína 5 associada a grandes homólogos (DLGAP5)
Proteína do domínio EGF-tipo recombinante, múltiplo 6 (EGFL6)
Proteína do Domínio EGF Recombinante, Múltiplo 7 (EGFL7)
Proteína Enah/Vasp-like (EVL) recombinante
FK506 Binding Protein Like Protein (FKBPL) Proteína ligadora FK506 como proteína (FKBPL)
Micrometria de caixa de teste de conteúdo de coenzima I NAD(H)FMS recombinante como tirosina quinase 3 (Flt3)
Proteína ligadora GATA 3 (GATA3)
Proteína ligadora GATA 4 (GATA4)
G Protein Coupled Receptor, Família C, Grupo 5, Membro A (GPRC5A)
HtrA肽酶1 (HTRA1) 重组蛋白 HtrA serina peptidase 1 (HTRA1) recombinante
HtrA4(HTRA4) recombinante HtrA serina peptidase 4 (HTRA4)