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Xangai Xinyue Biotecnologia Co., Ltd.
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OVTOKO Células de câncer de ovário humano

Modelo
Natureza do fabricante
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Categoria do produto
Local de origem
Visão geral
Propriedades básicas da célula $r$n Nome da célula OVTOKO Célula de câncer de ovário humano $r$n Alias da célula OVTOKO$r$n Número do produto XY-H1036$r$n Fonte do gênero Humano$r$n Idade Sexo Feminino$r$n Fonte do tecido Ovário$r$n Propriedades de crescimento de ovário$r$n Morfologia da célula de crescimento adjacente$r$n Especificações da célula epitelial$r$n 1 #215; 10^6cells/T25 garrafa de cultura ou embalagem de tubo de congelamento de 1ml
Detalhes do produto
OVTOKO Células de câncer de ovário humano
Propriedades básicas das células
Nome da célula
OVTOKO Células de câncer de ovário humano
Células não chamadas
OVTOKO
Número do produto
XY -H1036
Fonte da espécie
pessoa
Idade Sexo
mulher
Fontes organizacionais
ovário
Características de crescimento
Crescimento da parede
Forma celular
Tipo de células epiteliais
Perfil de fundo
-
Nível de Biosegurança
-
Especificações celulares
1 x 10^6cells/T25 garrafa de cultura ou embalagem de tubo de congelamento de 1mL
Detecção de Brancos
Nada
Meio de Cultura
RPMI1640 +10% soro bovino fetal
Condições de cultivo
Fase de gás:95%ar+5%dióxido de carbono; Temperatura:37
Condições de congelamento
Liquido congelado sem sangue, armazenamento de nitrogênio líquido
Tempo multiplicado
~24-30Horas

Após a recepção das célulasTratamento
1)Depois de receber as células, a parede da garrafa de desinfecção de 75% de álcool coloca a garrafa T25 a temperatura ambiente por cerca de 1 hora, se a garrafa de cultura for descoberta danificada, derramamento de líquido e poluição das células, por favor, entre em contato conosco imediatamente após tirar uma foto.
2)Confirme o estado da célula sob o microscópio 4 ou 5X, tirando 2-3 fotos das células recém-recebidas (10 x, 20 x) e uma foto da aparência da garrafa de cultura como base para o estado da célula no momento da recepção pós-venda.
3)Células de parede:As células são colocadas a temperatura ambiente por 1h, sob o microscópio para observar o crescimento das células e a situação de adesão, algumas células adesivas durante o transporte rápido podem cair devido à vibração e se agrupar após a queda.Se a densidade de crescimento das células observadas sob o espelho for inferior a 60%, o meio de irrigação pode ser removido da garrafa (se as células não pegadas precisarem de recuperação centrífuga, ressuspender na garrafa original), adicionar a mídia completa da pílula recém-formulada de 6-8 mL e colocar na caixa de cultura celular para continuar a cultura. Se a densidade de crescimento celular for superior a 70% a 80%, a transferência celular pode ser realizada. Durante a transmissão, as células que caíram devido à vibração de transporte precisam ser recuperadas por centrifugação.
4)Método de operação de extração durante o transporte celular: coletar as células extraídas após a centrifugação e descartar, limpar novamente com PBS, descartar por centrifugação, adicionar 1 ml de uma enzima no tubo de centrifugação para a digestão por cerca de 20 segundos, adicionandopílulasTodosDepois que o meio termina a digestão, a centrifugação é reabastecida e as células adherentes restantes operam de acordo com o método normal de transmissão de células adherentes.
5)Nota: o meio de cultura para transporte (meio de irrigação) não pode mais ser usado para cultivar células, por favor, substitua-o por uma nova formulação de acordo com as condições de cultura celular das instruçõespílulasTodosO meio de cultivo para cultivar células. A primeira transmissão após a recepção das células sugere a transmissão de garrafas de cultura T25 1: 2.

Três.FinoOperação de cultura celular
1) Recuperação de células:Os seguintes tratamentos de congelamento de culturas celulares são apenas a título informativo, e as etapas operacionais específicas são baseadas no manual de instruções do produto fornecido
Vai conter1 milhaTubo de congelamento da suspensão celular 37℃ banho de água agitar rapidamente para descongelar, mais4 mlO meio de cultura é misturado uniformemente. em1000 rpmCentrifugação sob condições3 minutosElimine o líquido, acrescente1-2 mlSopre bem depois do meio de cultura. Em seguida, todas as suspensões celulares são adicionadas a uma garrafa com uma quantidade moderada de meio para a cultura durante a noite (ou a suspensão celular é adicionada à6 centímetrosNo prato, adicione aproximadamente4 mlpílulasTodoscultivo durante a noite). No terceiro dia, troce o líquido e verifique a densidade celular.
2) Transmissão celular:Se a densidade celular for de 80% a 90%, a cultura de transmissão pode ser realizada.
a)Eliminar a limpeza de cultivo, usando a que não contém íons de cálcio e magnésioPBSLavar as células1-2Segunda vez.
b)mais1 milhalíquido digestivo (0,25%Tripsina-0,02%EDTAEm uma garrafa de cultura, deixe que o líquido digestivo penetre todas as células e coloque a garrafa de cultura em37Digestão em caixa de cultivo1 - 3 minutos(Dependendo da digestão celular), em seguida, observar a digestão celular sob o microscópio, se a maioria das células se arredondar e cair, rapidamente recuperar a mesa de operação, bater algumas vezes na garrafa de cultura e adicionar2-3 mlpílulasTodosO meio de cultura termina a digestão.
c)Depois de bater suavemente em um tubo centrífugo estéril,1000 rpmCentrífuga5 minutosEliminar o líquido, adicionar1-2 mlSopre bem após a cultura.
d)Pressione a suspensão celular.1:2Proporção para o novo conteúdode 8 mlO meio de cultivo é colocado em um novo prato ou garrafa em uma caixa de cultivo.
Pontos de atenção para a transmissão celular:
lÉ preciso.PBSLave novamente.
lAs células são observadas várias vezes para dominar o tempo, não terminar a digestão sem a queda básica das células e depois soprar para baixo, de modo que as células É mais fácil se separar e morrer.
lNão continue a bater nas células.
3) Congelação celular:Quando as células estão em bom estado de crescimento, as células podem ser congeladas. Por baixo.O T25 garrafas, por exemplo.
a)Recolher células e líquidos de cultura celular e carregar em um tubo centrífugo estéril,1000 rpmCentrifugação sob condições4 minutosElimine o líquido, usePBSLimpe-o novamente e descarte-o.PBSrealização da contagem celular.
b)Adicionar líquido congelado sem soro de células de acordo com o número de células para tornar a densidade celular1×10^6~1×10^7em / mlMisture suavemente e congele cada tubo.1mlSuspensão celular, atenção ao tubo de congelamento para marcação.
c)Coloque o tubo de congelamento-80geladeira,24 horasDepois de transferir para o armazenamento de nitrogênio líquido. Registre a localização do tubo de congelamento para a próxima coleta.
Quatro.Cultivar atenção
1)Problemas com as células e repetição
a)Vários problemas encontrados durante o transporte celular, perda de células, ruptura do corpo da garrafa, vazamento grave de líquido de cultura, etc., repetição;
b)Problemas de poluição celular, por favor, nos apresente resultados experimentais reais dentro de 3 dias após o recebimento do produto e reenvie após a verificação;
c)Depois de 2 horas de reposição de células enviadas em temperatura normal, 2 dias após a recuperação de células enviadas em gelo seco, a grande maioria das células não sobreviveram, (é necessário fornecer fotos reais e claras do estado das células), re-envio;
d)2 dias após a recuperação das células do congelamento seco ou as células do congelamento a temperatura normal são colocadas por 2 horas e não abertas, a contaminação aparece, a repetição;
e)Problemas de atividade celular, por favor, nos apresentar resultados experimentais reais dentro de 7 dias após o recebimento do produto, para identificar a vitalidade celular com a cromatologia azul de Taepan, e fotos celulares diárias, após verificação para reenviar;
f)As células são recebidas no mesmo dia e no dia 2,3, por favor, tire uma foto, 3 dias sem notificação, o produto é considerado qualificado. Problemas dentro de 4-7 dias devem ser fornecidos 3 dias antes do recebimento da foto da célula e a foto do problema da célula e as etapas detalhadas da operação relacionada com a célula, e se comunicar com o técnico, o técnico julgará que a nossa responsabilidade é reenviar.
2)Problemas com as células que não podem ser repetidos
a)As operações do cliente causam poluição celular, sem repetição;
b)Um grave erro de operação do cliente causou um mau estado da célula, sem repetição;
c)Não recomendamos o sistema de cultura celular devido ao mau estado celular, não repetição;
d)O estado celular é ruim, não fornecer imagens claras e verdadeiras do estado celular 3 dias antes da cultura, não re-emitir;
e)Quando a cultura celular é tratada por outros tratamentos que causam problemas com as células, não se repetir;
f)O recebimento das células e a descoberta de problemas com a comunicação com o pessoal de atendimento ao cliente durante o tempo comprovado é maior que 7 dias, sem reenvio;
g)Dependendo das circunstâncias
V. Atenção
1. Todas as células animais são consideradas potencialmente biológicamente perigosas e devem ser operadas dentro de um banco de biossegurança de nível secundário, com cuidado, todos os resíduos e utensílios que entraram em contato com a célula devem ser esterilizados antes de serem descartados.
2. É recomendado usar sempre luvas de proteção, roupas e máscaras de proteção durante a recuperação de células congeladas. Observação: O tubo de congelamento submerso em nitrogênio líquido vai vazar e vai lentamente encher o nitrogênio líquido. Quando descongelado, a fase de conversão de nitrogênio líquido em gás pode fazer com que o recipiente exploda ou sopra a tampa com força perigosa, gerando detritos volantes que causam danos pessoais.
3. Essa célula é apenas para uso científico! As instruções são apenas para referência com base no manual de chegada real!