WT9-7 Células epiteliais da doença renal poliquística do cromossomo comum humano

NegociávelAtualização em04/24

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Nome da célula WT 9-7 Cromossomo comum poliquístico renal epitelial $r$n Alias da célula WT 9-7$r$n Número do produto XY-H1032$r$n Fonte do gênero Humano $r$n Idade Sexo Feminino $r$n Fonte do tecido $r$n Características do crescimento renal $r$n Crescimento de parede $r$n Morfologia da célula epitelial $r$n Especificações da célula 1 #215; 10^6cells/T25 garrafa de cultura ou embalagem de tubo de congelamento de 1ml

Detalhes do produto

WT 9-7 células epiteliais da doença renal poliquística cromossoma comum humana

Propriedades básicas das células
Nome da célula	WT 9-7 células epiteliais da doença renal poliquística cromossoma comum humana
Células não chamadas	WT 9-7
Número do produto	XY-H1032
Fonte da espécie	pessoa
Idade Sexo	mulher
Fontes organizacionais	rins
Características de crescimento	Crescimento da parede
Forma celular	Tipo de células epiteliais
Perfil de fundo	-
Nível de Biosegurança	-
Especificações celulares	1 x 10^6cells/T25 garrafa de cultura ou embalagem de tubo de congelamento de 1mL
Detecção de Brancos	Nada
Meio de Cultura	DMEM + 10% soro bovino fetal (FBS)
Condições de cultivo	Fase de gás:95%ar+5%dióxido de carbono; Temperatura:37℃
Condições de congelamento	Liquido congelado sem sangue, armazenamento de nitrogênio líquido
Tempo multiplicado	~24-30Horas

Após a recepção das célulasTratamento

1)Depois de receber as células, a parede da garrafa de desinfecção de 75% de álcool coloca a garrafa T25 a temperatura ambiente por cerca de 1 hora, se a garrafa de cultura for descoberta danificada, derramamento de líquido e poluição das células, por favor, entre em contato conosco imediatamente após tirar uma foto.

2)Confirme o estado da célula sob o microscópio 4 ou 5X, tirando 2-3 fotos das células recém-recebidas (10 x, 20 x) e uma foto da aparência da garrafa de cultura como base para o estado da célula no momento da recepção pós-venda.

3)Células de parede:As células são colocadas a temperatura ambiente por 1h, sob o microscópio para observar o crescimento das células e a situação de adesão, algumas células adesivas durante o transporte rápido podem cair devido à vibração e se agrupar após a queda.Se a densidade de crescimento das células observadas sob o espelho for inferior a 60%, o meio de irrigação pode ser removido da garrafa (se as células não pegadas precisarem de recuperação centrífuga, ressuspender na garrafa original), adicionar a mídia completa da pílula recém-formulada de 6-8 mL e colocar na caixa de cultura celular para continuar a cultura. Se a densidade de crescimento celular for superior a 70% a 80%, a transferência celular pode ser realizada. Durante a transmissão, as células que caíram devido à vibração de transporte precisam ser recuperadas por centrifugação.

4)Método de operação de extração durante o transporte celular: coletar as células extraídas após a centrifugação e descartar, limpar novamente com PBS, descartar por centrifugação, adicionar 1 ml de uma enzima no tubo de centrifugação para a digestão por cerca de 20 segundos, adicionandoApós a terminação da digestão do meio completo da pílula, a centrifugação é reabastecida e as células adherentes restantes operam de acordo com o método normal de transmissão de células adherentes.

5)Nota: o meio de cultura para transporte (meio de irrigação) não pode mais ser usado para cultivar células, por favor, substitua-o por uma nova formulação de acordo com as condições de cultura celular das instruçõesA pílula é um meio completo para cultivar células. A primeira transmissão após a recepção das células sugere a transmissão de garrafas de cultura T25 1: 2.

Três.FinoOperação de cultura celular

1) Recuperação de células:Os seguintes tratamentos de congelamento de culturas celulares são apenas a título informativo, e as etapas operacionais específicas são baseadas no manual de instruções do produto fornecido

Vai conter1 milhaTubo de congelamento da suspensão celular 37℃ banho de água agitar rapidamente para descongelar, mais4 mlO meio de cultura é misturado uniformemente. em1000 rpmCentrifugação sob condições3 minutosElimine o líquido, acrescente1-2 mlSopre bem depois do meio de cultura. Em seguida, todas as suspensões celulares são adicionadas a uma garrafa com uma quantidade moderada de meio para a cultura durante a noite (ou a suspensão celular é adicionada à6 centímetrosNo prato, adicione aproximadamente4 mlpílulas em meio completo, cultivo durante a noite). No terceiro dia, troce o líquido e verifique a densidade celular.

2) Transmissão celular:Se a densidade celular for de 80% a 90%, a cultura de transmissão pode ser realizada.

a)Eliminar a limpeza de cultivo, usando a que não contém íons de cálcio e magnésioPBSLavar as células1-2Segunda vez.

b)mais1 milhalíquido digestivo (0,25%Tripsina-0,02%EDTAEm uma garrafa de cultura, deixe que o líquido digestivo penetre todas as células e coloque a garrafa de cultura em37Digestão em caixa de cultivo1 - 3 minutos(Dependendo da digestão celular), em seguida, observar a digestão celular sob o microscópio, se a maioria das células se arredondar e cair, rapidamente recuperar a mesa de operação, bater algumas vezes na garrafa de cultura e adicionar2-3 mlA pílula completa do meio de cultura termina a digestão.

c)Depois de bater suavemente em um tubo centrífugo estéril,1000 rpmCentrífuga5 minutosEliminar o líquido, adicionar1-2 mlSopre bem após a cultura.

d)Pressione a suspensão celular.1:2Proporção para o novo conteúdode 8 mlO meio de cultivo é colocado em um novo prato ou garrafa em uma caixa de cultivo.

Pontos de atenção para a transmissão celular:

lÉ preciso.PBSLave novamente.

lAs células são observadas várias vezes para dominar o tempo, não terminar a digestão sem a queda básica das células e depois soprar para baixo, de modo que as células É mais fácil se separar e morrer.

lNão continue a bater nas células.

3) Congelação celular:Quando as células estão em bom estado de crescimento, as células podem ser congeladas. Por baixo.O T25 garrafas, por exemplo.

a)Recolher células e líquidos de cultura celular e carregar em um tubo centrífugo estéril,1000 rpmCentrifugação sob condições4 minutosElimine o líquido, usePBSLimpe-o novamente e descarte-o.PBSrealização da contagem celular.

b)Adicionar líquido congelado sem soro de células de acordo com o número de células para tornar a densidade celular1×10^6~1×10^7em / mlMisture suavemente e congele cada tubo.1mlSuspensão celular, atenção ao tubo de congelamento para marcação.

c)Coloque o tubo de congelamento-80geladeira,24 horasDepois de transferir para o armazenamento de nitrogênio líquido. Registre a localização do tubo de congelamento para a próxima coleta.

Quatro.Cultivar atenção

1)Problemas com as células e repetição

a)Vários problemas encontrados durante o transporte celular, perda de células, ruptura do corpo da garrafa, vazamento grave de líquido de cultura, etc., repetição;

b)Problemas de poluição celular, por favor, nos apresente resultados experimentais reais dentro de 3 dias após o recebimento do produto e reenvie após a verificação;

c)Depois de 2 horas de reposição de células enviadas em temperatura normal, 2 dias após a recuperação de células enviadas em gelo seco, a grande maioria das células não sobreviveram, (é necessário fornecer fotos reais e claras do estado das células), re-envio;

d)2 dias após a recuperação das células do congelamento seco ou as células do congelamento a temperatura normal são colocadas por 2 horas e não abertas, a contaminação aparece, a repetição;

e)Problemas de atividade celular, por favor, nos apresentar resultados experimentais reais dentro de 7 dias após o recebimento do produto, para identificar a vitalidade celular com a cromatologia azul de Taepan, e fotos celulares diárias, após verificação para reenviar;

f)As células são recebidas no mesmo dia e no dia 2,3, por favor, tire uma foto, 3 dias sem notificação, o produto é considerado qualificado. Problemas dentro de 4-7 dias devem ser fornecidos 3 dias antes do recebimento da foto da célula e a foto do problema da célula e as etapas detalhadas da operação relacionada com a célula, e se comunicar com o técnico, o técnico julgará que a nossa responsabilidade é reenviar.

2)Problemas com as células que não podem ser repetidos

a)As operações do cliente causam poluição celular, sem repetição;

b)Um grave erro de operação do cliente causou um mau estado da célula, sem repetição;

c)Não recomendamos o sistema de cultura celular devido ao mau estado celular, não repetição;

d)O estado celular é ruim, não fornecer imagens claras e verdadeiras do estado celular 3 dias antes da cultura, não re-emitir;

e)Quando a cultura celular é tratada por outros tratamentos que causam problemas com as células, não se repetir;

f)O recebimento das células e a descoberta de problemas com a comunicação com o pessoal de atendimento ao cliente durante o tempo comprovado é maior que 7 dias, sem reenvio;

g)Dependendo das circunstâncias

V. Atenção

1. Todas as células animais são consideradas potencialmente biológicamente perigosas e devem ser operadas dentro de um banco de biossegurança de nível secundário, com cuidado, todos os resíduos e utensílios que entraram em contato com a célula devem ser esterilizados antes de serem descartados.

2. É recomendado usar sempre luvas de proteção, roupas e máscaras de proteção durante a recuperação de células congeladas. Observação: O tubo de congelamento submerso em nitrogênio líquido vai vazar e vai lentamente encher o nitrogênio líquido. Quando descongelado, a fase de conversão de nitrogênio líquido em gás pode fazer com que o recipiente exploda ou sopra a tampa com força perigosa, gerando detritos volantes que causam danos pessoais.

3. Essa célula é apenas para uso científico! As instruções são apenas para referência com base no manual de chegada real!

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