F81 (Células renais de gato)

F81 (Células renais de gato)

Propriedades do produto

Introdução do produto

Espécie Gato Doméstico

Idade (Sexo) Desconhecido

Fontes organizacionais Desconhecido

Características de crescimento Células de parede

Forma celular Tipo de células epiteliais

Nível de Biosegurança 1

Médio de Crescimento RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P / S

Proporção de transmissão recomendada 1:2-1:4

Frequência de troca recomendada 2-3 vezes / semana

Condições de congelamento

Liquido congelado:55% Base + 40% FBS + 5% DMSO

Temperatura: nitrogênio líquido

Condições de cultivo

Gas: ar,95%； CO2, 5%

Temperatura:37℃

Tratamento celular:

1) Recuperação de células congeladas:

O tubo de congelamento contendo 1 ml de suspensão celular é agitado rapidamente para descongelar em banho de água a 37 ° C e adicionado a um tubo centrífugo contendo 4-6 ml de meio de cultura para misturar uniformemente. Centrifuge 3-5min em condições de 1000RPM, descarte o líquido superior e ressuspenda as células no meio de cultura. Em seguida, a suspensão celular é adicionada a uma garrafa de cultura (ou prato) com meio de cultura de 6-8 ml para uma cultura de 37 ° C durante a noite. No dia seguinte, o crescimento celular e a densidade celular foram observados sob o microscópio.

2) Transferência celular: se a densidade celular chegar a 80% -90%, a cultura de transmissão pode ser realizada.

Para a transmissão de células adherentes podem ser consultados os seguintes métodos:

1. Eliminar a cultura e lavar as células 1-2 vezes com PBS sem íons de cálcio e magnésio.

Adicionar 0,25% (w / v) -0,53 mM EDTA na garrafa de cultura (garrafa T25 1-2mL, garrafa T75 2-3mL), colocar-se na caixa de cultura de 37 ° C para digerir por 1-2 minutos (as células difíceis de digerir podem prolongar adequadamente o tempo de digestão), em seguida, observar a digestão celular sob o microscópio, se a maioria das células se arredondar e cair, rapidamente recuperar a mesa de operação, bater alguns toques na garrafa de cultura e adicionar 3-4ml de meio contendo 10% FBS para terminar a digestão.

3. suavemente derrotado e aspirado, centrifugar 3-5min em 1000RPM, descartar o líquido superior, adicionar 1-2mL de líquido de cultura e soprar bem. Divida a suspensão celular em uma proporção de 1: 2 em uma nova garrafa T25, adicione 6-8ml de novo meio de cultura configurado de acordo com as instruções para manter a vitalidade do crescimento das células, e a transmissão subsequente é realizada em uma proporção de 1: 2 a 1: 5 de acordo com as circunstâncias reais.

3) Congelação celular: após a recepção das células, é recomendado congelar um lote de sementes celulares nas primeiras 3 gerações para uso experimental posterior.

Etapas de operação de cultura de transmissão celular:

(1) Quando a morfologia celular e a densidade de crescimento atingem 90% sob o microscópio, a transmissão é realizada.

2) Eliminar o líquido de cultura. Adicione PBS para limpeza 1 a 2 vezes e agite bem depois de descartar.

(3) Adicione o fundo da garrafa e contenha EDTA.

(4) garrafa de cultivo colocado no recipiente de cultivo de 37 ° C para a digestão, cerca de 3 minutos para tirar, com o microscópio para observar se as células têm mais de 80% da quantidade, a contração ocorre e a distância celular aumenta. Bater suavemente a garrafa de cultura para que as células restantes caiam, adicionar duas vezes a quantidade para interromper a digestão e soprar uniformemente para evitar a digestão excessiva.

(5) a suspensão celular é aspirada no tubo de centrifugação, 1000rpm / min centrifugação 3 ~ 5min.

(6) Absorber o líquido superior, adicionar o líquido de cultura para ressuspender as células e soprar as células para que sejam uniformemente dispersas.

(7) Absorber a suspensão celular, escolher a densidade apropriada para a vacinação em uma nova garrafa de cultura, complementar o líquido de cultura e agitar bem, colocando uma caixa de cultura de CO2 a 37 ° C para a cultura.

(8) Determinar o tempo de troca de fluido ou transmissão de acordo com o estado de crescimento celular.

9) Congelação das células

Produtos que a empresa está vendendo:

Proteína tumoral de ratoKit de teste p53 (TP53), nome em inglês: Kit de ELISA TP53

Kit de ELISA de diferenciação de células solúveis de rato 30 (sCD30)

Kit de teste de seletina E do rato (E-Selectin/CD62E) do mouseE-SelectinELISAkit 96T/48T

CLIAKitforHumanIg-likeanscriptsReceptor, ILTsRELISAKit-like receptores de transcrição

miniaturaBanco de dados de biblioteca de RNA (em construção)

ELISAKitADAM8 Protease metálica semelhante à integrasa8 de rato

Proteína Carboxipeptidase A2 / CPA2

Fatores de crescimento endotelial vascular de origem endócrina(EG-VEGF) 重组蛋白 Fator de Crescimento Endotelial Vascular Derivado da Glândula Endocrina Recombinante (EG-VEGF)

Proteína HER4 / ErbB4

Proteína CSNK1G1 Human recombinante Proteína CSNK1G1 / CKI-gamma 1 (His & GST)

Proteína NA H1N1 H1N1 Neuraminidase / NA (mutação N295S) (alta atividade)

Fatores de crescimento endotelial vascular de origem endócrina(EG-VEGF) 重组蛋白 Fator de Crescimento Endotelial Vascular Derivado da Glândula Endocrina Recombinante (EG-VEGF)

Proteína CSNK1G1 Human recombinante Proteína CSNK1G1 / CKI-gamma 1 (His & GST)

Proteína Carboxipeptidase A2 / CPA2

Proteína NA H1N1 H1N1 Neuraminidase / NA (mutação N295S) (alta atividade)

Proteína HER4 / ErbB4

F81 (Células renais de gato)Receptores de ratosKit de ELISA 96T/48T

Fator de coagulação humana XIII (F XIII) Kit ELISA

Humananspoeras associadas ao processamento de antígenos, TAPELISAKit Kit de teste de proteínas transportadoras relacionadas ao processamento de antígenos humanos (TAP) 96T/48T

Kit de teste humano 2,3-dinocromboxaneB2,2,3-dinor-TXB2Especificações do kit de teste humano 2,3Dinor thromboxane B2 (2,3-dinor-TXB2): 96T / 48T

FungosKit de teste de atividade de oxidase de amostras de células de levedura 20 vezes

Especificações do Kit de Teste para Apo-A1ELISAKit Apo-A1: 96T/48T

Antígeno de diferenciação de glóbulos brancos solúvel em ratosKit de teste 86(B7-2/sCD86) Kit de teste 96T/48T Montagem/original

Antígeno de diferenciação de glóbulos brancos solúvel em ratosKit de teste com 40 ligantes (sCD40L) Kit de teste 96T/48T Montagem/original

Antígeno de diferenciação de glóbulos brancos solúvel em ratosKit de teste de 30 ligantes (sCD30L) Kit de teste 96T/48T Montagem/original

Antígeno de diferenciação de glóbulos brancos solúvel em ratosKit de teste 30 (sCD30) Kit de teste 96T/48T Montagem/original

Tratamento após a recepção das células:

1) Depois de receber as células, a parede da garrafa de desinfecção de 75% de álcool coloca a garrafa T25 em uma caixa de cultivo de 37 ° C para colocar cerca de 2-3 h, se a garrafa de cultivo for descoberta danificada, derramamento líquido e poluição celular, por favor, entre em contato conosco após tirar uma foto.

2) Por favor, confirme o estado da célula sob o microscópio 4 ou 5X, ao mesmo tempo tirar 2-3 fotos das células recém-recebidas (10 x, 20 x) e uma foto da aparência da garrafa de cultura, como base para o estado da célula no momento da recepção após a venda.

3) Células adhesivas: as células são colocadas em uma caixa de cultivo de 37 ° C por 2-3h, observando o crescimento das células e a situação de adesão sob o microscópio, algumas células adhesivas podem cair devido à vibração e se agrupar após a queda durante o transporte rápido. Se a densidade de crescimento das células observadas sob o espelho for inferior a 60%, o meio de irrigação pode ser removido da garrafa (se as células não pegadas precisarem de recuperação centrífuga, ressuspender na garrafa original), adicionar o meio de cultura recém-formulado de 6-8 mL e colocar na caixa de cultura celular para continuar a cultura. Se a densidade de crescimento celular for superior a 70% a 80%, a transferência celular pode ser realizada. Durante a transmissão, as células que caíram devido à vibração de transporte precisam ser recuperadas por centrifugação.