SU-DHL-16 linfoma humano

Tratamento celular:

1) Recuperação de células congeladas:

O tubo de congelamento contendo 1 ml de suspensão celular é agitado rapidamente para descongelar em banho de água a 37 ° C e adicionado a um tubo centrífugo contendo 4-6 ml de meio de cultura para misturar uniformemente. Centrifuge 3-5min em condições de 1000RPM, descarte o líquido superior e ressuspenda as células no meio de cultura. Em seguida, a suspensão celular é adicionada a uma garrafa de cultura (ou prato) com meio de cultura de 6-8 ml para uma cultura de 37 ° C durante a noite. No dia seguinte, o crescimento celular e a densidade celular foram observados sob o microscópio.

2) Transferência celular: se a densidade celular chegar a 80% -90%, a cultura de transmissão pode ser realizada.

Para a transmissão de células adherentes podem ser consultados os seguintes métodos:

1. Eliminar a cultura e lavar as células 1-2 vezes com PBS sem íons de cálcio e magnésio.

Adicionar 0,25% (w / v) -0,53 mM EDTA na garrafa de cultura (garrafa T25 1-2mL, garrafa T75 2-3mL), colocar-se na caixa de cultura de 37 ° C para digerir por 1-2 minutos (as células difíceis de digerir podem prolongar adequadamente o tempo de digestão), em seguida, observar a digestão celular sob o microscópio, se a maioria das células se arredondar e cair, rapidamente recuperar a mesa de operação, bater alguns toques na garrafa de cultura e adicionar 3-4ml de meio contendo 10% FBS para terminar a digestão.

3. suavemente derrotado e aspirado, centrifugar 3-5min em 1000RPM, descartar o líquido superior, adicionar 1-2mL de líquido de cultura e soprar bem. Divida a suspensão celular em uma proporção de 1: 2 em uma nova garrafa T25, adicione 6-8ml de novo meio de cultura configurado de acordo com as instruções para manter a vitalidade do crescimento das células, e a transmissão subsequente é realizada em uma proporção de 1: 2 a 1: 5 de acordo com as circunstâncias reais.

3) Congelação celular: após a recepção das células, é recomendado congelar um lote de sementes celulares nas primeiras 3 gerações para uso experimental posterior.

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Propriedades do produto

Introdução do produto

Fonte: Humano

Sexo: Homem, idade desconhecida

Características de crescimento: Crescimento suspenso

Forma celular: linfocito

Especificações celulares:1 x 106 células/T25ou1 milhaTubo de congelamento

Condições de cultivo:RPMI-1640 + 10% soro bovino fetal (FBS)37℃5% de CO2

Condições de congelamento:90% FBS + 10% DMSO

Método de transmissão:1：4para1：10transmissão,1-2História1geração

Etapas de operação de cultura de transmissão celular:

(1) Quando a morfologia celular e a densidade de crescimento atingem 90% sob o microscópio, a transmissão é realizada.

2) Eliminar o líquido de cultura. Adicione PBS para limpeza 1 a 2 vezes e agite bem depois de descartar.

(3) Adicione o fundo da garrafa e contenha EDTA.

(4) garrafa de cultivo colocado no recipiente de cultivo de 37 ° C para a digestão, cerca de 3 minutos para tirar, com o microscópio para observar se as células têm mais de 80% da quantidade, a contração ocorre e a distância celular aumenta. Bater suavemente a garrafa de cultura para que as células restantes caiam, adicionar duas vezes a quantidade para interromper a digestão e soprar uniformemente para evitar a digestão excessiva.

(5) a suspensão celular é aspirada no tubo de centrifugação, 1000rpm / min centrifugação 3 ~ 5min.

(6) Absorber o líquido superior, adicionar o líquido de cultura para ressuspender as células e soprar as células para que sejam uniformemente dispersas.

(7) Absorber a suspensão celular, escolher a densidade apropriada para a vacinação em uma nova garrafa de cultura, complementar o líquido de cultura e agitar bem, colocando uma caixa de cultura de CO2 a 37 ° C para a cultura.

(8) Determinar o tempo de troca de fluido ou transmissão de acordo com o estado de crescimento celular.

9) Congelação das células

Tratamento após a recepção das células:

1) Depois de receber as células, a parede da garrafa de desinfecção de 75% de álcool coloca a garrafa T25 em uma caixa de cultivo de 37 ° C para colocar cerca de 2-3 h, se a garrafa de cultivo for descoberta danificada, derramamento líquido e poluição celular, por favor, entre em contato conosco após tirar uma foto.

2) Por favor, confirme o estado da célula sob o microscópio 4 ou 5X, ao mesmo tempo tirar 2-3 fotos das células recém-recebidas (10 x, 20 x) e uma foto da aparência da garrafa de cultura, como base para o estado da célula no momento da recepção após a venda.

3) Células adhesivas: as células são colocadas em uma caixa de cultivo de 37 ° C por 2-3h, observando o crescimento das células e a situação de adesão sob o microscópio, algumas células adhesivas podem cair devido à vibração e se agrupar após a queda durante o transporte rápido. Se a densidade de crescimento das células observadas sob o espelho for inferior a 60%, o meio de irrigação pode ser removido da garrafa (se as células não pegadas precisarem de recuperação centrífuga, ressuspender na garrafa original), adicionar o meio de cultura recém-formulado de 6-8 mL e colocar na caixa de cultura celular para continuar a cultura. Se a densidade de crescimento celular for superior a 70% a 80%, a transferência celular pode ser realizada. Durante a transmissão, as células que caíram devido à vibração de transporte precisam ser recuperadas por centrifugação.

Produtos que a empresa está vendendo:

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NAPAReorganizar pessoasNAPA / alfa-SNAPProteínaProteína

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