Células interplásticas do fígado de rato

Relatório experimental:

Separação e cultivo:

1, sob condições estériles, remova o tecido atrial de ratos SD de idade 1-3d e, em seguida, use PBS para limpar este bloco de tecido duas vezes, cortando o tecido em cerca de 1mm3 de tamanho;

2, adicionar 4 mL de digestão enzimática (0,1% e 0,1% de colágenase tipo I) ao bloco de tecido, misturar 10s, colocar a digestão em 37 ° C em 10 min, em seguida, soprar com uma goteira para fazer uma suspensão unicelular, precipitar naturalmente e coletar a limpeza, colocar em 4 ° C após a terminação da digestão com um meio que contém 10% FBS;

3, o tecido restante adicionar 3-4mL de líquido digestivo enzimático, misturar 10s, colocar 37 ° C após a digestão 10 min, de acordo com o método acima recolher a limpeza e terminar a digestão após 4 ° C colocar, repetir esta etapa 2-3 vezes até que o tecido é digerido;

4, filtre a digestão celular com uma tela de aço inoxidável de 200 meshes, centrífuga de 1200r / min para 10min, descarte a limpeza superior, as células de precipitação são misturadas com um meio de cultura que contém 10% de FBS DMEM / F12, vacinadas em garrafas de cultura de 25 cm2, colocadas em 37 ° C, 5% de CO2 em uma caixa de cultura;

5, após a diferença de adesão à parede 1h, aspirar o meio de cultura, de acordo com a necessidade experimental de vacinação na placa de 6 buracos para continuar a cultivar;Identificação de imunofluorescência:

1, espera que as células do músculo atrial cresçam até 80% de fusão, descartar o meio de cultura, lavar as células com PBS de crescimento térmico 2 vezes, cada vez por 10 minutos, e, em seguida, fixar as células com poliformaldeído de 4% a temperatura ambiente por 15 minutos;

2, PBS lavar as células 2 vezes, cada vez por 10 min, em seguida, em condições de 4 ° C, com 0,1% Triton X-100 permeabilidade por 15 min;

3, PBS lavar as células 2 vezes, cada vez por 10min, em seguida, em condições de temperatura ambiente, com 4% BSA para fechar as células por 30min;

Dilue a alfa-actina em proporção de 1: 100 e coloque-a no frigorífico de 4 ° C para incubar as células durante a noite;

5, PBS lavar as células 3 vezes, 10min cada vez, diluir a resistência anti-alfa-actina em proporção de 1: 150, colocar 1h em condições de 37 ° C;

Enxague com PBS 3 vezes, cada vez por 10 minutos, observar a imagem sob o microscópio fluorescente invertido e tirar fotos.

Introdução das células:

O fígado é uma grande glândula no corpo humano e um grande órgão substancial. As células-tronco do fígado pertencem a células-tronco adultas, e estudos descobriram que podem diferenciar-se em ossos, cartilagem, tendões, gordura, etc. A diferenciação de células-tronco adultas para células musculares torna muitos músculos degenerativos e hereditários mais uma opção melhor.

Características das células:

1） O tecido é derivado de tecido hepático normal de animais experimentais.

2)Identificação celular:CD44A coloração fluorescente é positiva.

3)Pureza celular identificada superior a90%- É.

4)Não contémO HIV-1eHBVeVHC, brancos, leveduras e.

5)Métodos de crescimento celular: Shuttle, células irregulares, cultura de parede.

Médio recomendado:

Recomendamos o usoDelfoIntermediação original Células Sistema de cultivo como meio de cultivo in vitro.

Atenção:

Depois de receber as células, primeiro observe se a garrafa de células está intacta, se o líquido de cultura tem vazamento, turbidez e outros fenômenos, se o fenômeno acima ocorrer, entre em contato conosco prontamente.

Leia cuidadosamente as instruções de células para entender as informações relacionadas com as células, como a morfologia celular, o meio de cultura usado, a proporção sérica, as citocinas necessárias, etc., para garantir que as condições de cultura celular sejam consistentes, se as condições de cultura não forem consistentes e causarem problemas com as células, a responsabilidade será assumida pelo próprio cliente.

Limpe a superfície da garrafa com 75% de álcool e observe o estado da célula sob o microscópio. Devido a problemas de transporte, é normal que algumas células se tornem fragmentadas devido a mudanças de temperatura e fortes colisões. Depois de observar o bom estado das células, a parede da garrafa de desinfecção com álcool de 75% colocou a garrafa T25 em um compartimento de cultivo de 37 ° C para 4-6 h.

As células de parede podem ser digeridas, as células em suspensão podem ser misturadas diretamente para coletar as células, 900 rpm-1000 rpm para centrifugar por 3 min e descartar. Adicione 5 mL de PBS para ressuspender as células, centrifuge em seguida 900 rpm-1000 rpm por 3 min, ressuspenda as células com um meio de cultura fresco * e injete-as em uma nova garrafa ou prato de cultivo e coloque-as em uma caixa para cultivo.

5. Solicite ao cliente usar o mesmo meio de cultura em condições para a cultura celular.

Recomenda-se que os clientes tirem algumas fotos das células nos primeiros 3 dias após o recebimento das células, para registrar o estado das células e facilitar a comunicação com o nosso departamento técnico. As células sensíveis individuais podem apresentar situações instáveis ​​devido ao transporte, por favor, entre em contato conosco prontamente para informar sobre a situação específica das células para que nossos técnicos possam acompanhar a visita até que o problema seja resolvido.

A célula é somente para uso científico.

Nota: o meio de cultura para transporte (meio de irrigação) não pode mais ser usado para cultivar células, por favor, substitua o meio de cultura * recém-formulado de acordo com as condições de cultura celular do manual de instruções para cultivar células. A transmissão posterior das células recebidas sugere a transmissão 1:2.

Nota: 1: 2 transmissão é 1 garrafa T25 para 2 garrafas T25 ou 2 pratos de 6 cm. Não uma garrafa T25 para passar 2 pratos de 10 cm.

Produtos que a empresa está vendendo:

Elnelisakit

Péptidos órfãos de ratos(OFQ/N) ElisaKit de teste analítico

Kit ELISA OFQ/N

Globulina de porcoG(IgG)elisaKit de teste analítico

IgGELISAKit

Marcadores fluorescentes de lexina de amendoim topo (PNA-FITCKit de coração

Ratos liberam a glândula beta-papiladora(f)βCG)ElisaKit de teste

Milho geneticamente modificadoTC1507Kit de teste genético

Ratos α1Açúcar ácido(α1-AGP)elisaKit de teste

Lactina de macaco(PRL/LTH) ElisaKit de teste analítico

Kit de ELISA PRL/LTH

Dihidropirimidinase humana# 2 (dpysl 2) ELISAKit de teste analítico

Dpysl 2 alias

Dinucleótidos de adenina(NADH) ElisaKit de teste

Protease da vesícula de rato3 (CASP3) ElisaKit de teste

Acato acetónico (PKKit de teste quantificador de comparação de atividade total

Receptores de açúcar humano(MR) ElisaKit de teste analítico

MOSPD3Anticorpos proteicos

MOSPD3

1Caixa de leitura aberta do cromossomo95Anticorpos

C1ORF95

Fator de transcriçãoE3 anti-TFE3

Proteína de ligação ao ribosoma1Anticorpos Anti-RRBP1

Nucleoproteína3Anticorpos Proteína Anti-Nucleolar 3/Repressor de Apoptose com CARD

3Anticorpos receptores Receptor anti-vitamina D / VDR

O Cy5Marcado coelho anti galinhaIgG H&L

Interferons beta em ratos(IFN-β/ IFNB)elisaKit de teste analítico

IFN-βKit de ELISA IFNB

Fator nuclear humano κO BInibidor da quinase α(IKK-αElisaKit de teste analítico

Células interplásticas do fígado de ratoHumano...αPersuasivo.