Células epiteliais de ratos

Relatório experimental:

Separação e cultivo:

1, sob condições estériles, remova o tecido atrial de ratos SD de idade 1-3d e, em seguida, use PBS para limpar este bloco de tecido duas vezes, cortando o tecido em cerca de 1mm3 de tamanho;

2, adicionar 4 mL de digestão enzimática (0,1% e 0,1% de colágenase tipo I) ao bloco de tecido, misturar 10s, colocar a digestão em 37 ° C em 10 min, em seguida, soprar com uma goteira para fazer uma suspensão unicelular, precipitar naturalmente e coletar a limpeza, colocar em 4 ° C após a terminação da digestão com um meio que contém 10% FBS;

3, o tecido restante adicionar 3-4mL de líquido digestivo enzimático, misturar 10s, colocar 37 ° C após a digestão 10 min, de acordo com o método acima recolher a limpeza e terminar a digestão após 4 ° C colocar, repetir esta etapa 2-3 vezes até que o tecido é digerido;

4, filtre a digestão celular com uma tela de aço inoxidável de 200 meshes, centrífuga de 1200r / min para 10min, descarte a limpeza superior, as células de precipitação são misturadas com um meio de cultura que contém 10% de FBS DMEM / F12, vacinadas em garrafas de cultura de 25 cm2, colocadas em 37 ° C, 5% de CO2 em uma caixa de cultura;

5, após a diferença de adesão à parede 1h, aspirar o meio de cultura, de acordo com a necessidade experimental de vacinação na placa de 6 buracos para continuar a cultivar;Identificação de imunofluorescência:

1, espera que as células do músculo atrial cresçam até 80% de fusão, descartar o meio de cultura, lavar as células com PBS de crescimento térmico 2 vezes, cada vez por 10 minutos, e, em seguida, fixar as células com poliformaldeído de 4% a temperatura ambiente por 15 minutos;

2, PBS lavar as células 2 vezes, cada vez por 10 min, em seguida, em condições de 4 ° C, com 0,1% Triton X-100 permeabilidade por 15 min;

3, PBS lavar as células 2 vezes, cada vez por 10min, em seguida, em condições de temperatura ambiente, com 4% BSA para fechar as células por 30min;

Dilue a alfa-actina em proporção de 1: 100 e coloque-a no frigorífico de 4 ° C para incubar as células durante a noite;

5, PBS lavar as células 3 vezes, 10min cada vez, diluir a resistência anti-alfa-actina em proporção de 1: 150, colocar 1h em condições de 37 ° C;

Enxague com PBS 3 vezes, cada vez por 10 minutos, observar a imagem sob o microscópio fluorescente invertido e tirar fotos.

Introdução das células:

A membrana é a camada externa da parede do globo ocular, composta de colágeno denso e fibras elásticas, cuja estrutura é dura e opaca. A borda frontal da membrana consolidada é ligada à borda da córnia, e a parte traseira continua com a membrana dura do nervo óptico.

A membrana consolidada é dividida de fora para dentro em: camada superior da membrana consolidada; camada principal; A camada inferior da membrana. A camada superior é composta por células epiteliais.

Características das células:

1） O tecido é derivado do tecido ocular normal de animais experimentais.

2)Identificação celular: keratina de amplo espectro(PCK)A coloração fluorescente é positiva.

3)Pureza celular identificada superior a90%- É.

4)Não contémO HIV-1eHBVeVHC, brancos, leveduras e.

5)Métodos de crescimento celular: epitelial, células irregulares, cultura de parede.

Médio recomendado:

Recomendamos o usoDelfoOriginal Epidermis Sistema de Cultura Celular como meio de cultivo in vitro.

Atenção:

Depois de receber as células, primeiro observe se a garrafa de células está intacta, se o líquido de cultura tem vazamento, turbidez e outros fenômenos, se o fenômeno acima ocorrer, entre em contato conosco prontamente.

Leia cuidadosamente as instruções de células para entender as informações relacionadas com as células, como a morfologia celular, o meio de cultura usado, a proporção sérica, as citocinas necessárias, etc., para garantir que as condições de cultura celular sejam consistentes, se as condições de cultura não forem consistentes e causarem problemas com as células, a responsabilidade será assumida pelo próprio cliente.

Limpe a superfície da garrafa com 75% de álcool e observe o estado da célula sob o microscópio. Devido a problemas de transporte, é normal que algumas células se tornem fragmentadas devido a mudanças de temperatura e fortes colisões. Depois de observar o bom estado das células, a parede da garrafa de desinfecção com álcool de 75% colocou a garrafa T25 em um compartimento de cultivo de 37 ° C para 4-6 h.

As células de parede podem ser digeridas, as células em suspensão podem ser misturadas diretamente para coletar as células, 900 rpm-1000 rpm para centrifugar por 3 min e descartar. Adicione 5 mL de PBS para ressuspender as células, centrifuge em seguida 900 rpm-1000 rpm por 3 min, ressuspenda as células com um meio de cultura fresco * e injete-as em uma nova garrafa ou prato de cultivo e coloque-as em uma caixa para cultivo.

5. Solicite ao cliente usar o mesmo meio de cultura em condições para a cultura celular.

Recomenda-se que os clientes tirem algumas fotos das células nos primeiros 3 dias após o recebimento das células, para registrar o estado das células e facilitar a comunicação com o nosso departamento técnico. As células sensíveis individuais podem apresentar situações instáveis ​​devido ao transporte, por favor, entre em contato conosco prontamente para informar sobre a situação específica das células para que nossos técnicos possam acompanhar a visita até que o problema seja resolvido.

A célula é somente para uso científico.

Nota: o meio de cultura para transporte (meio de irrigação) não pode mais ser usado para cultivar células, por favor, substitua o meio de cultura * recém-formulado de acordo com as condições de cultura celular do manual de instruções para cultivar células. A transmissão posterior das células recebidas sugere a transmissão 1:2.

Nota: 1: 2 transmissão é 1 garrafa T25 para 2 garrafas T25 ou 2 pratos de 6 cm. Não uma garrafa T25 para passar 2 pratos de 10 cm.

Produtos que a empresa está vendendo:

Proteína de ligação de ácidos graxos intestinais de rato(iFABP) ElisaKit de teste

Reagentes de análise de acetilação

Interfín branco do rato4(IL-4)elisaKit de teste analítico

Deshidrogenação monoascorbica (MDHAR(Caixa de teste)

CélulasO CYP2B1Kit de teste quantitativo de fluorescência de expressão de proteína

Kit de teste vermelho neutro funcional para purificação de lisosomas

大鼠整合素α6 (ITG)α6)ElisaKit de teste

Lesões fecais (Salmonella TifiKit de teste genético qualitativo

Inibidores da beta-lactaminase em ratos(BLI) ElisaKit de teste teste gratuito

BTB/POZ (em inglês)Proteína de domínio estrutural19AnticorposBTBD19

CD43Anticorpos monoclonaisCD43

Receptores de péptidos de sódioO CAnticorpos monoclonaisReceptor C do péptido natriurético

fosforizaçãoDeficientes 1AnticorposFosfo-Dab1 (Ser491)

γ-Glutamina transpeptidase2Anticorpos de cadeia pesadaCadeia pesada GGT2

Interfín branco1recetor1AnticorposIL-1R1

CitocromaP450 2C18AnticorposO CYP2C18

Inibidores de quinase dependentes de proteínas do ciclo celular2CAnticorposCDKN2C/p18 INK4c (em inglês)

O LProteína do canal do cálcioA1Subtipo6AnticorposCACH6/Cav2.3

O MSI2Anticorpos proteicosO MSI2

Anticorpos monoclonaisFibrinógeno humano

Proteínas da família dos transportadores de solíduos38MembrosA8AnticorposO SLC38A9

Proteína âncora específica do testículo1AnticorposANKMY1

Proteína de formação óssea9AnticorposBMP9

Fator de amadurecimento da lipase1AnticorposLMF1

Cinases dependentes da ciclina8AnticorposCDK8

Ciclo celular de leveduraO Mpassos (Sincronia(Kit de processamento)

KIAA1614Anticorpos proteicos

KIAA1614

ATP5EAnticorpos proteicos

Células epiteliais de ratosATP5E